PCR analýza hepatitidy C a interpretace výsledků

Hepatolog

Související specializace: gastroenterolog, terapeut.

Adresa: St. Petersburg, Academician Lebedev St., 4/2.

Hepatitida C je zánětlivá patologie, při které jsou postiženy jaterní buňky. Toto onemocnění se vyvíjí v důsledku proniknutí viru hepatitidy C (HVC) do lidského těla..

Forma nemoci může být akutní nebo chronická..

Nejčastěji příznaky akutní formy patologie u většiny pacientů chybí, někdy je onemocnění doprovázeno bolestmi v břiše, sníženou pracovní kapacitou, zvýšenou únavou, zhoršenou chutí k jídlu, tmavým stínem moči, změnou barvy stolice, zažloutnutím kůže a sliznic, bolestmi kloubů. Tyto příznaky se obvykle objevují 6-8 týdnů po infekci, ale mohou se objevit o šest měsíců později..

S rozvojem takových jevů je nutné kontaktovat zdravotnické zařízení a podrobit se komplexnímu vyšetření celého organismu. V rámci lékařského vyšetření se provádí krevní test na hepatitidu C..

Dnes, pomocí moderních diagnostických technik, může být tato patologie detekována v počátečním stadiu vývoje, což výrazně zvyšuje šance na úplné vyléčení nemoci.

Analýza hepatitidy C musí projít následující skupiny lidí:

  • ženy během porodu dítěte;
  • osoby se známkami hepatitidy;
  • zaměstnanci zdravotnických zařízení;
  • potenciální dárci orgánů a krve;
  • drogově závislí, infikovaní HIV, lidé, kteří vedou hektický intimní život.

Seznam nezbytných studií

Jaké testy je třeba provést s hepatitidou C? Pro přesnou diagnózu onemocnění, identifikaci jeho příčin a určení stavu jaterního parenchymu jsou nutné následující studie:

  • obecná analýza moči a krve;
  • biochemický krevní test;
  • PCR analýza;
  • krevní test k detekci protilátek proti HVC;
  • krevní test na existující protilátky proti jejich vlastním jaterním buňkám;
  • jaterní biopsie.

Dešifrování krevního testu na hepatitidu C provádí odborník. Budeme podrobněji zkoumat každou výzkumnou metodu a také zjistíme, který test na hepatitidu C je nejpřesnější..

Obecná analýza

Při provádění obecného krevního testu na hepatitidu C můžete vyhodnotit stav pacienta. Změny v krevním obrazu nejsou vnímány jako specifické příznaky hepatitidy, avšak u tohoto onemocnění se vyskytují poruchy, jako například:

  • koncentrace hemoglobinu, krevních destiček a bílých krvinek klesá;
  • zvyšuje se obsah lymfocytů;
  • je narušena koagulace krve;
  • Zvyšuje se rychlost sedimentace erytrocytů (ESR).

Obecná analýza moči umožňuje detekovat ve své složení urobeline - žlučový pigment, který se vyskytuje v moči v důsledku zhoršené funkce jater.

Biochemická analýza

Biochemický krevní test na hepatitidu C může odhalit porušení, jako například:

  • zvýšený obsah jaterních enzymů (alanin transaminázy - ALT a aspartátaminotransferázy - AST), které vstupují do krevního oběhu, když jsou poškozeny hepatocyty. V normálním stavu by tyto ukazatele u mužů neměly být vyšší než 37 IU / l, u žen - ne vyšší než 31 IU // l. Zvýšená koncentrace ALT a AST u asymptomatické hepatitidy C je často jediným příznakem tohoto onemocnění. Kromě toho se zvyšuje hladina alkalické fosfatázy glutamyl-transpeptidázy v krevním složení (obvykle ne vyšší než 150 IU / l)..
  • obsah bilirubinu (obecného i přímého) v krvi je překročen. Pokud hladina žlutého pigmentu v krevním séru přesáhne 27–34 μmol / l, objeví se žloutenka (až 80 μmol / lv mírné formě, 86–169 μmol / l v mírné formě, nad 170 μmol / l v těžké formě).
  • Hladina albuminu se snižuje, naopak se zvyšuje koncentrace globulinu gama. Gama globuliny se skládají z imunoglobulinů - protilátek, které chrání tělo před patogeny.
  • zvýšená koncentrace triglyceridů v krvi.

Studie PCR

Pomocí PCR můžete diagnostikovat původce nemoci. Provedení této analýzy umožňuje detekovat virus v krvi, i když je jeho množství minimální. PCR analýza hepatitidy C vám umožňuje určit existující infekci v krvi po 5 dnech od okamžiku infekce, tedy dlouho před objevením protilátek.

Pokud je výsledek krevního testu na hepatitidu C pomocí PCR pozitivní, znamená to přítomnost aktivní infekce v těle. Pomocí této metody můžete provést kvalitativní a kvantitativní studium HVC RNA.

V průběhu kvalitativní analýzy PCR na hepatitidu C je možné detekovat existující virus v lidském těle.

Tento diagnostický postup se provádí, pokud je v krvi detekována anti-HVC..

Interpretace testu na hepatitidu C obsahuje informaci, že v těle je detekována nebo nedetekována infekce. V normálním stavu nejsou patologické látky v krvi detekovány.

Pokud test na hepatitidu C dává pozitivní výsledek, znamená to, že patogenní mikroorganismus se neustále dělí a ovlivňuje jaterní buňky.

Výsledky takové analýzy mohou být nespolehlivé, je to možné v následujících případech:

  • s kontaminací použitého biomateriálu;
  • v přítomnosti heparinu v krvi;
  • v přítomnosti chemických nebo proteinových látek (inhibitorů) ve studovaném biomateriálu ovlivňujícím prvky PCR.

Kvantitativní analýza hepatitidy C poskytuje informace o množství viru obsaženého v krvi, tj. Určuje virovou zátěž. Tímto pojmem se rozumí množství HVC RNA přítomné v krvi (například v 1 ml). V dekódování kvantitativní analýzy pro hepatitidu C je tato hodnota vyjádřena digitálně, měřeno v IU / ml.

Krev pro PCR s hepatitidou C je darována před terapeutickými opatřeními. Po provedení analýzy v 1, 4, 12 a 24 týdnech. Studie ve 12. týdnu je indikativní a provádí se za účelem posouzení účinnosti léčebných postupů..

Pokud je analýza na hepatitidu C během těhotenství pozitivní a hodnoty virové zátěže jsou překročeny, riziko přenosu patogenů z nemocné matky na dítě se několikrát zvyšuje. Také se zvýšenými hodnotami virové zátěže je provádění terapeutických opatření obtížné.

Podle interpretace testů na hepatitidu C překračují-li hodnoty virové zátěže 800 000 IU / ml, jsou vysoké. Pokud jsou hodnoty pod 400 000 IU / ml, považuje se úroveň virové zátěže za nízkou..

PCR analýza hepatitidy C je považována za nejpřesnější a má oproti jiným možnostem výzkumu několik výhod, jmenovitě:

  • přímá diagnóza původce nemoci. Při provádění tradičního výzkumu se určuje přítomnost proteinových markerů, které jsou produkty životně důležité aktivity patogenních látek. To jen říká, že infekce je přítomna v krvi. Při provádění analýzy hepatitidy C pomocí PCR je možné určit typ patogenu nebezpečné patologie.
  • specifičnost této techniky. Během tohoto postupu se v biomateriálu stanoví jedinečná oblast DNA, která odpovídá pouze jednomu typu patogenu. To minimalizuje pravděpodobnost nepravdivých výsledků..
  • vysoká citlivost. Při provádění analýzy PCR lze detekovat minimální množství viru. To je důležité, pokud jsou identifikovány oportunistické látky, které představují hrozbu, pouze pokud se zvýší jejich hladina..
  • při použití této techniky v jednom vzorku biomateriálu lze detekovat několik patogenů najednou.
  • můžete odhalit skryté infekce. Kromě toho analýza umožňuje diagnostikovat patogeny, které žijí uvnitř buněk a mají vysokou antigenní variabilitu.

Pokud jsou výsledky studie pozitivní, pak jsou v biomateriálu detekovány stopy viru, pak má síť v těle infekci.

Negativní PCR analýza na hepatitidu C znamená, že v biomateriálu nejsou žádné stopy infekce.

Imunologický výzkum

Tato metoda umožňuje určit protilátky proti všem typům viru hepatitidy, stejně jako protilátky proti jaterním buňkám vašeho vlastního těla, jejichž vývoj je usnadněn vývojem autoimunitní hepatitidy.

Výsledky získané během studie jsou relevantní po dobu 3 měsíců, pak byste měli znovu darovat krev na hepatitidu C.

Je také možné provést expresní studii pomocí speciálních testovacích proužků. Tato analýza umožňuje stanovit protilátky proti viru C ve složení krve a slin. Tento postup lze provádět samostatně, doma.

Biopsie jater

K provedení takové analýzy se odebere prvek jaterního parenchymu a provede se histologické vyšetření získaného biomateriálu. To vám umožní posoudit stav těla: identifikovat zánětlivé, nekrotické ložiska, fázi fibrózy atd..

Dnes se používají testy, které nahrazují histologickou analýzu jaterního parenchymu.

Specifické biomarkery krve jedu se používají k hodnocení fáze poškození jater a intenzity zánětlivého procesu. Pomocí Fibrotestu můžete posoudit stupeň proliferace vláknité tkáně.

Při provádění Actitestu získáte informace o intenzitě patologických procesů v jaterním parenchymu. Pomocí Steatotestu je možné diagnostikovat tukovou degeneraci tkáně jater a zhodnotit stupeň tohoto procesu. Fibromax sestává ze všech výše uvedených testů a může zahrnovat některé další studie..

Příprava na studium

Jaké testy se provádějí na hepatitidu C a jak se provádí tento nebo ten typ studie, jsme zjistili. Stejně důležité je vědět, jak se na analýzu připravit..

K dosažení spolehlivých výsledků se doporučuje dodržovat následující požadavky:

  • testy na hepatitidu C musí být provedeny ráno, na lačný žaludek. Jídlo by mělo být konzumováno nejméně 8 hodin před studií..
  • Biomateriál lze užívat ve dne nebo večer. V tomto případě je důležité, aby mezi posledním jídlem a analýzou uplynulo nejméně 5 až 6 hodin.
  • Před darováním krve na hepatitidu C byste měli odmítnout čaj, kávu, džus nebo jiné nápoje, povolena je pouze voda.
  • 48 hodin před studií je nutné vyloučit použití mastných, smažených potravin a alkoholických nápojů.
  • alespoň hodinu před analýzou se zdržte kouření.
  • neprovádějte analýzu ihned po ultrazvuku, instrumentálním, rentgenovém vyšetření, masáži nebo fyzioterapii.
  • den před studií je nutné vyloučit užívání léků a intenzivní fyzickou aktivitu. Emoční stres je také kontraindikován..
  • 15 minut před studií se doporučuje provést v klidném stavu.

Odběr krve

Kde se dá testovat na hepatitidu C? Biomateriál je odebrán pro další výzkum v laboratoři zdravotnického zařízení nebo u pacienta doma.

Krev ze žíly se odebírá takto:

  • s pomocí speciálního turniketu omotaného kolem předloktí pacienta je žilní krevní tok pozastaven. Díky těmto manipulacím budou žíly naplněny krví a budou patrnější, což výrazně usnadní proces zavádění jehly.
  • oblast kůže, do které bude jehla zavedena, je důkladně ošetřena alkoholem nebo kapalinou obsahující alkohol.
  • jehla je pečlivě vložena do žíly, poté je k ní připojena zkumavka speciálně určená pro odběr krve.
  • ihned po zasunutí jehly do žíly se kompresní turniket vyjme z paže pacienta.
  • poté, co se odebere objem krve potřebný pro analýzu, jehla jemně odstraní z žíly.
  • na místo vpichu musí být aplikován sterilní bavlněný nebo gázový tampón namočený v alkoholu.
  • Aby se předešlo výskytu hematomu, měl by se tampon zatlačit s trochou úsilí do oblasti vpichování jehly, ohnout rameno na loketním kloubu a držet v této poloze několik minut. Takové akce také pomohou zastavit krev rychleji..

Pokud je technika vnitřní správy dobrá, je tento postup absolutně bezpečný a při čtení nezpůsobuje bolest..

Ve vzácných případech je po odběru krve možný otok žíly. Tento jev se nazývá flebitida. Komprese (ne horká) pomůže vyřešit problém, měla by být aplikována na oteklé oblasti kůže několikrát denně.

Určité problémy se mohou objevit také v případě poruchy krvácení. Užívání aspirinu, warfarinu a dalších ředidel krve může způsobit krvácení. Proto je před provedením analýzy nutné odmítnout užívat jakékoli léky. Pokud nelze léčbu zrušit, informujte odborníka.

Termíny a ceny

Kolik testu na hepatitidu C je provedeno? Výsledky krevního testu na hepatitidu mohou být hotové za několik hodin a za několik dní (obvykle ne déle než 8 dnů). Trvání přípravy výsledků závisí na typu viru a vybrané metodě analýzy. Rychlejší je studie prováděná pomocí PCR. Výsledky v tomto případě budou připraveny během několika hodin..

Kolik stojí test na hepatitidu C? Cena zákroku se může lišit v závislosti na klinice a složitosti studie od 400 do 11 000 rublů.

Měli byste si uvědomit, že vytvoření dostatečného objemu anti-HVC protilátek může trvat několik týdnů. Proto může být výsledek studie v rané fázi vývoje patologie falešně negativní.

Kromě toho je možné získat nepravdivé údaje pomocí analýzy nízké kvality a porušení podmínek přepravy získaného biomateriálu (vzorky musí být dodány do laboratoře nejpozději 2 hodiny po odběru krve).

Pokud je výsledek studie pozitivní, musíte neprodleně kontaktovat lékaře infekčního onemocnění. Specialista provede další vyšetření a předepíše příslušné ošetření..

PCR analýza k detekci hepatitidy C

Hepatitida C je nejnebezpečnější kategorií onemocnění, která se vyznačuje akutním symptomatickým obrazem a zvláštní závažností průběhu. Hlavním původcem této infekce je HCV virus, který se skládá z řady molekul ribonukleové kyseliny (RNA). Když vstoupí do těla, velmi rychle mutuje a přechází z akutního do chronického stadia, což je důvod, proč je nutné jej diagnostikovat v raných stádiích vývoje. A v tom pomůže analýza PCR na hepatitidu C..

Obecná fakta o hepatitidě C

Kategorie C virové hepatitidy je považována za nejnebezpečnější, protože má tendenci k časté variabilitě během vývoje. V důsledku tohoto jevu nemůže lidský imunitní systém produkovat správné protilátky pro přirozený boj proti infekci, což způsobuje komplikace, jako je cirhóza, rakovina jater a žloutenka..

V inkubačním období se virové onemocnění nijak neprojevuje, protože pacient ani neví o jeho existenci v těle. Po určité době se však hepatitida cítí následujícími příznaky:

  • Vzhled chronické únavy;
  • Periodická bolest v hlavě, kloubech a pravé hypochondrii;
  • Náhlé záchvaty nevolnosti a zvracení;
  • Rychlé hubnutí;
  • Zvýšená teplota (až 37 stupňů);
  • Charakteristické žloutnutí kůže.

V této fázi patologie netrvá déle než 1–2 týdny, poté získává chronickou formu a terorizuje pacienta po celý zbytek svého života, a to ve formě opakovaných relapsů. Chcete-li se vyhnout takovému nepříjemnému výsledku, můžete použít krevní test na hepatitidu C, který by měl být proveden okamžitě po kontaktu s pravděpodobným nositelem infekce..

Indikace pro diagnostiku

Studium polymerázové řetězové reakce je předepsáno ne všem pacientům. Hlavní údaje o jeho provádění jsou:

  • Potřeba identifikovat původce virové patologie;
  • Identifikace porovnáním krve pacienta s dostupnými genetickými materiály;
  • Vyšetření tkání vytvořených biopsií;
  • Studie maligních nádorů a leukémie;
  • Detekce genetické nemoci.

Pozornost! PCR analýza hepatitidy C je velmi účinná metoda pro detekci patologie v rané fázi jejího vývoje. Včasná diagnóza onemocnění zvyšuje šance na úspěšné zotavení.

Druhy PCR analýzy

PCR diagnóza hepatitidy C zahrnuje biologický krevní test k detekci virových RNA prvků v něm. Podle jeho výsledků je možné určit nejen přítomnost nebo nepřítomnost infekce v těle, ale také stupeň jeho vývoje (současný genotyp), jakož i některé charakteristické rysy kurzu. V tomto případě je indikátor PCR pouze jedním z klíčových prvků diagnózy a bez dalších testů, které by potvrdily diagnózu hepatitidy C, nebude fungovat..

Kvalitní

Kvalitativní studie polymerázové řetězové reakce na přítomnost původce hepatitidy C je standardním ukazatelem, který dokáže odpovědět pouze na jednu otázku pacienta: je v těle virus nebo ne. Negativní výsledek tohoto testu navíc není stoprocentním potvrzením nepřítomnosti infekce. Ve skutečnosti bude při nízké koncentraci patogenu v lidské krvi úroveň bakterií HCV nižší než minimum a výzkum PCR jej jednoduše nezjistí..

Kvantitativní

Kvantitativní analýza polymerázové řetězové reakce je rozsáhlejším indikátorem, který demonstruje současnou virovou zátěž na těle pacienta. Podle jeho výsledků může lékař říci, kolik škodlivých RNA je přítomno v krvi člověka v době diagnózy. Tento typ PCR je však předepsán pouze v případech, kdy předchozí studie přinesla pozitivní výsledek..

Díky kvantitativnímu testu určují odborníci tři hlavní ukazatele charakterizující virovou patologii:

  • Úroveň infekčnosti (vysoká koncentrace RNA buněk naznačuje schopnost choroby se šířit z nosiče na jiné osoby);
  • Účinnost předepsané terapie;
  • Přibližné trvání léčby a očekávané prognózy (chronická hepatitida C neopouští tělo a při neustálém používání léků se pacient může vyhnout pouze opakovaným relapsům).

Minimální ukazatel kvantitativní PCR analýzy je roven 600 tisíc IU / ml. Vyšší hodnota patologie 650 - 70000 IU / ml je v akutním stadiu. Maximální přípustná hladina RNA buněk v krvi pacienta nesmí překročit hranici 800 000 IU / ml.

Genotypizace

Analýza genotypizace po detekci RNA viru hepatitidy C probíhá mezi dodatečnými studiemi a na základě jejích výsledků lze určit pouze současný patologický genotyp. Ale pro jmenování terapie hraje tento indikátor klíčovou roli, protože každá fáze infekce má svůj charakter a symptomatický obraz..

Kromě toho podle výsledků genotypizace může odborník určit aktuální stav jater pacienta. Ve skutečnosti platí, že čím nižší je genotyp člověka, tím větší je pravděpodobnost, že se jeho orgán podrobil strukturálním změnám, zvětšuje se velikost nebo získává nepřirozenou formu..

Hlavní výhody studie

Ve srovnání s tradičními krevními testy má analýza PCR na hepatitidu C několik výhod. A to:

  • Schopnost určit povahu patogenu;
  • Vysoká citlivost na virovou zátěž (na rozdíl od OAC, ELISA a dalších podobných testů, analýza PCR velmi zřídka vykazuje falešně pozitivní výsledky);
  • Široká škála zkoumaných biomateriálů (k detekci viru můžete studovat nejen krev pacienta, ale také části epitelu nebo odříznutí ze sliznic);
  • Rychlé dešifrování výsledků;
  • Schopnost detekovat onemocnění v rané fázi vývoje;
  • Zpracování získaného biomateriálu za účelem snížení úrovně jeho infekčnosti během studie;
  • Plná automatizace procesů.

Je důležité to vědět! Aby byla tato analýza provedena správně, měli by laboratorní pracovníci provést důkladnou kontrolu zařízení a zkoumaných prvků. A to lze považovat za vážnou nevýhodu testu PCR..

Příprava na postup dárcovství krve

Před testem na detekci prvků ribonukleové kyseliny v krvi musí pacient podstoupit malou přípravu, která probíhá v několika fázích. První fáze zahrnuje následující omezení:

  • Odmítnutí alkoholických nápojů (nejméně 3 dny před dodáním biomateriálu);
  • Vyloučení jakékoli fyzické aktivity (2-3 dny před analýzou PCR);
  • Zákaz kouření a jídla (uložen subjektu několik hodin před zákrokem).

Pokud byla RNA buněk hepatitidy C přenesena na člověka z pravděpodobného nosiče pohlavním stykem, budou také přidány následující zákazy:

  • Ukončení všech typů pohlavního styku, ústními, análními a vaginálními otvory (2-3 dny před plánovanou analýzou);
  • Abstinence od odchodu malých potřeb (krátce před zahájením řízení);
  • Vyloučení všech typů detergentů během koupání (den před studií).

Současně je přísně zakázáno provádět PCR pro hepatitidu C během menstruačního cyklu, protože pravděpodobnost chyby při dešifrování výsledků bude téměř sto procent.

Dešifrování výsledků analýzy

V závislosti na typu analýzy PCR na hepatitidu C může být výsledek nejen negativní nebo pozitivní, ale také numericky dešifrovaný. Pro kvantitativní test bude označení získaných indikátorů následující:

Virové zatížení
(IU / ml)
Co to znamená
NeNorma pro zdravého člověka, označující nepřítomnost infekce v jeho těle. Někdy lze tuto hodnotu pozorovat také při nízké koncentraci RNA v krvi (jsou přítomny protilátky proti hepatitidě C a PCR je negativní). K tomuto jevu však dochází jen zřídka..
Ne více než 1,8xZatížení těla je minimální, což jasně ukazuje na přítomnost patologie v inkubační době.
Méně než 8xVirus se teprve začíná vyvíjet a hledá fázi exacerbace. V této fázi má smysl úplná léčba nemoci.
Více než 8xNemoc rychle postupuje a ničí játra pacienta. Projevuje se první symptomatologie. Šance na zotavení jsou velmi malé.
Více než 2,4xNemoc parazituje tělo příliš dlouho a jeho charakter se postupně mění z akutního na chronický. Průběh léčby takovou virovou zátěží bude tak dlouhý, jak je to možné, a není šance na úplné uzdravení.

Výsledky genotypizace můžete dešifrovat podle další tabulky uvedené níže:

IndexOznačení
RNA 1B, 2B nebo 3BV lidské krvi byla nalezena hepatitida kategorie C s genotypem charakteristickým pro území Ruské federace.
RNA 4, 5, 6 nebo 7Virová patologie je povahy, která není pro Rusko a země SNS charakteristická. S tímto výsledkem testu je pacient poslán na řadu dalších analýz k určení specifičnosti genotypu.
NeMnožství kyseliny ribonukleové je příliš malé nebo takový prvek ve studovaném biomateriálu úplně chybí.

Kvalitativní analýza PCR pro hepatitidu C může určit, zda virus detekoval RNA v krvi pacienta nebo ne. Zbývající informace o nemoci pro lékaře jsou poskytovány dvěma výše uvedenými testy.

Falešně pozitivní a falešně negativní výsledky

Navzdory skutečnosti, že studium polymerázové řetězové reakce je považováno za poměrně přesnou metodu pro stanovení virových patologií, stále se mohou vyskytnout některé chyby ve výsledcích.

A nejčastěji je vyvolávají následující okolnosti:

  • Míchání biomateriálů v laboratoři (pokud plazma vstoupí do škrábání ze sliznice, moči nebo jiných tekutin, výsledek testu PCR bude falešně pozitivní);
  • Nedodržení pravidel přepravy a skladování studovaného materiálu (v případě nesprávné manipulace biologické tekutiny ztratí svůj informační obsah, díky čemuž analýza ukáže falešně negativní výsledek);
  • Nedostatek sterility v laboratorní místnosti (tato situace je zcela podobná předchozí situaci, která vyvolává chyby v dekódování analýzy PCR);
  • Ignorování nevhodnosti činidel (často příčinou falešného výsledku studie polymerázové řetězové reakce jsou laboratorní materiály, jejichž platnost vypršela).

Současně lze získat falešné dešifrování, i když nejsou dodržována výše uvedená pravidla pro přípravu na darování krve. V tomto případě však budete muset opakovaný postup provést na vlastní náklady.

Frekvence PCR analýzy

Omezení testu PCR v moderní medicíně není stanoveno. Doporučený počet studií pro každou kategorii pacientů se však bude mírně lišit. A to:

  • Zdravý pacient je testován jednou za 1-2 roky;
  • U osoby podstupující terapii hepatitidy C je biomateriál zkontrolován dvakrát: před léčbou a uprostřed kurzu;
  • Těhotné dívky mohou být testovány 1-2 krát měsíčně během těhotenství;
  • U novorozenců se postup opakuje 1-2krát ročně.

Na rozdíl od ultrazvukového skenování je tato možnost pro detekci virové patologie považována za absolutně bezpečnou, proto ji lze použít v každém věku.

Jedinou nevýhodou tohoto postupu jsou jeho vysoké náklady. Pokud jde o účinnost, je test PCR nejinformativnější analýzou, kterou lze použít ke stanovení nejen přítomnosti infekce v těle, ale také současného stadia jejího vývoje. A to je klíčový faktor při předepisování správné terapie..

PCR analýza na hepatitidu C

Hepatitida C je závažné onemocnění, které ničí játra. Může to vést k cirhóze. Mezi počátkem onemocnění a okamžikem, kdy se začnou protilátky vytvářet, může trvat až šest měsíců, takže není možné diagnostikovat nemoc pomocí imunosorbentového testu s enzymem. Včasná analýza onemocnění a zahájení léčby pomůže analyzovat PCR na hepatitidu C.

Indikace studie

Když potřebujete složit analýzu:

  • jestliže enzymový imunotest dal pozitivní výsledek;
  • pacient má příznaky cirhózy nebo poškození jater: mění se ve velikosti, zvětšuje se slezina, v břiše jsou viditelné dilatační žíly, kůže zbledne, na pravé straně břicha jsou pozorovány bolesti;
  • aktivita ALT a AST v krevním testu je zvýšena;
  • před zahájením léčby za účelem stanovení množství viru v krvi infikované osoby;
  • abyste viděli, jak účinná byla terapie. Po léčbě - sledovat své zdraví a zabránit recidivě;
  • pokud je diagnostikována hepatitida B, aby se vyloučilo smíšené poškození jater;
  • po pohlavním styku s osobou infikovanou hepatitidou.

Cíle průzkumu

Účelem PCR (nebo polymerázové řetězové reakce) je studovat složení krve a detekovat flavivirus (hepatitida C). Významnou výhodou této analýzy je, že rozpoznává virus ve stadiu, kdy ještě nezačal proces nevratných reakcí. PCR vám umožní vidět, jak špatně je tělo ovlivněno, ukazuje kvalitativní charakteristiky a určuje genotyp viru. To vše vám umožňuje předepsat nejvhodnější léčbu pro každý konkrétní případ..

Varianty analýz

PCR pro detekci hepatitidy C zahrnuje několik studií:

  • kvalitativní analýza;
  • kvantitativní analýza;
  • genotypizace.

Kvalitativní analýza

PCR se také nazývá kvalitativní analýza. Pokud vykazuje negativní výsledek, pak je nemožné rozpoznat virus v těle, protože jeho obsah je menší, než kolik zařízení dokáže zachytit. V takové situaci je nutné stanovit, jak citlivé je činidlo, aby se upravil další roztok..

Analýza může ukázat pozitivní výsledek přibližně do pěti dnů poté, co byla osoba infikována.

Kvantitativní analýza

Tento typ analytické studie ukazuje úroveň virové zátěže, tj. Koncentraci flaviviru v těle - kolik fragmentů viru je na 1 krychlový cm krve pacienta.

Tento typ analýzy PCR je předepsán pacientovi před zahájením antivirové terapie nebo po třech měsících léčby, aby bylo vidět, jak efektivní je předepsaný průběh..

Tento typ analýzy ukazuje:

  • jak velké je nebezpečí nakažení jiné osoby, je tato pravděpodobnost přímo úměrná indikacím virové zátěže;
  • jaké ošetření je v tomto případě vhodné a jak plodné to bude;
  • trvání léčby - čím vyšší je koncentrace virů, tím delší bude terapie.

Pacient by měl vědět, že závažnost onemocnění nemusí záviset na úrovni virové zátěže. Někdy, i při vysoké koncentraci virů v krvi pacienta, jsou játra jen nepatrně poškozena. Pokud však těhotná žena má vysokou úroveň virové zátěže, je pravděpodobné, že nemoc přenáší na své dítě.

Předpokládá se, že nižší standard koncentrace RNA viru je až 600 000 IU / ml, průměr je od 600 000 do 700 000, nejvyšší od 800 000 a vyšší.

Genotypizace

Vzhledem k tomu, že tento virus je citlivý na vysoké mutace, je velmi důležité určit, který genotyp je během studie v krvi osoby. Celkem existuje 11 genotypů hepatitidy C a mnoho jejich poddruhů. Ale v Rusku jsou společné pouze tři: 1, 2 a 3.

Genotypizace umožňuje určit, jak odolný je virus. Způsob léčby závisí na tom..

Všechny genotypy hepatitidy C reagují na léčbu odlišně. 1 genotyp je léčen po dobu nejméně jednoho roku a šance na zotavení je asi 60%. Genotypy 2 a 3 jsou léčeny po dobu šesti měsíců a pravděpodobnost, že se onemocnění zbaví, je asi 85%.

Kromě toho genotypizace umožňuje zjistit, v jakém stavu je pacientova játra. Například hromadění tuku v játrech naznačuje, že pacient trpí 3 genotypy viru.

Krevní test v této fázi ukazuje postavu, která charakterizuje genotyp. Někdy není možné určit genotyp a odpovědi laboratoře ukazují, že nebyl zadán. To znamená, že člověk trpí genotypem, který není v této zeměpisné oblasti běžný. Abyste ji mohli detekovat, budete muset znovu projít analýzu, ale s diagnostickým systémem, který ji dokáže rozpoznat.

Dešifrovací proces

Při analýze PCR na hepatitidu C získanou z laboratoře jsou obvykle uvedena určitá data a vy je můžete dokonce dešifrovat sami:

  • detekováno / nedetekováno (kvalitativní analýza);
  • počet virů (kvantitativní analýza);
  • číslo genotypu;
  • název testu.

Věří se, že největší pozornost by měla být věnována druhému bodu, protože na základě těchto ukazatelů můžete vytvořit prognózu, určit dobu trvání léčby a její typ..

I přes srozumitelnost analýzy nemůžete samostatně diagnostikovat a samoléčit, výsledky analýzy musí být předloženy ošetřujícímu lékaři.

Jak se připravit na analýzu

Pro dosažení spolehlivého výsledku je důležité dodržovat řadu pravidel:

  1. Stojí za to provést testy ráno na lačný žaludek (pokuste se jíst naposledy naposledy 8 hodin před zákrokem).
  2. Než darujete krev, nepijte nic jiného než vodu.
  3. Dva dny k odstranění mastných a smažených potravin a alkoholu.
  4. Alespoň hodinu je lepší se vzdát cigaret.
  5. Nedoporučuje se provádět testy po masáži, ultrazvuku nebo RTG.
  6. Den před vyšetřením by měl pacient opustit léky, fyzickou aktivitu a emoční stres.
  7. Půl hodiny před vyšetřením by měla být klidná a uvolněná..

Rychlost vyšetření PCR je ovlivněna tím, jaký typ viru pacient trpí a jakou metodou se provádí krevní test. V závislosti na složitosti může pacient obdržet výsledky testu za několik hodin nebo několik dní. Ale obvykle to netrvá déle než 7 dní.

Náklady na test PCR jsou ovlivněny stavem kliniky, kam pacient půjde a jak obtížná bude analýza. Cena se pohybuje od 400 rublů do 11 tisíc.

Je důležité, aby pacient věděl, že existuje něco jako negativní falešné testy. K tomu může dojít, pokud byla krev pro analýzu vyrobena nesprávně, v rozporu s pravidly nebo byla nepřiměřeně transportována (například se dostal do laboratoře více než dvě hodiny po odběru). V takové situaci riskuje pacient falešný dojem o svém zdravotním stavu a ztrácí drahocenný čas.

Proto je nesmírně důležité zvolit nejvhodnější kliniku, která se stará o její pověst a nemůže si dovolit zanedbávat pacienty. Před rozhodnutím se vyplatí přečíst recenze o instituci a jejích zaměstnancích. Výběr je lepší zastavit na prestižní a známé klinice - pravděpodobnost chyby v tomto případě bude malá.

Virus hepatitidy C, definice RNA. (HCV-RNA, kvalitativní) v krevním séru

Stanovení RNA viru hepatitidy C (HCV) v krevním séru polymerázovou řetězovou reakcí (PCR) s detekcí v reálném čase.

Identifikovaný fragment je specifickým místem RNA viru hepatitidy C. Identifikované genotypy: la, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6, bez ohledu na podtyp. Specifičnost stanovení je 100%. Citlivost stanovení - 60 IU / ml.

  • Klinické příznaky hepatitidy.
  • Preventivní screeningové studie (RNA viru hepatitidy C je nejčasnějším markerem akutní infekce).
  • Kontaktujte průzkumy.
  • Diagnóza hepatitidy smíšené etiologie - identifikace vedoucího viru.
  • Identifikace fáze aktivní replikace viru v chronickém stavu.
  • Sledování účinnosti terapie.
  • Cirhóza jater.

Interpretace výsledků výzkumu obsahuje informace pro ošetřujícího lékaře a nejedná se o diagnózu. Informace v této části nelze použít pro autodiagnostiku a samoléčení. Lékař provádí přesnou diagnózu pomocí výsledků tohoto vyšetření a nezbytných informací z jiných zdrojů: historie, výsledky jiných vyšetření atd..

Virus hepatitidy C, plazma RNA (HCV, PCR), počet.

RNA viru hepatitidy C, PCR, krev

Studijní informace

Studie vám umožňuje určit množství RNA viru hepatitidy C v krevní plazmě. Používá se k diagnostice hepatitidy C a výběru terapie.

Příčinou onemocnění je virus hepatitidy C (HCV). Jedná se o virus obsahující RNA, který patří do čeledi Flaviviridae. Má hepatotropy a ničí hlavně jaterní buňky, ale může se také množit v některých typech bílých krvinek a poškozovat je. Je schopen způsobit lymfoproliferativní onemocnění B-buněk, Sjogrenovu chorobu a kryoglobulinémii.
Způsoby přenosu:

  • parenterální (krví);
  • sexuální;
  • z matky na dítě během porodu.
Toto onemocnění je nejčastěji asymptomatické a přechází do chronického stádia. 15% pacientů se vyznačuje akutními projevy: ztráta chuti k jídlu, bolesti těla, nevolnost, rychlý úbytek hmotnosti.

Indikace pro účely studie

  • Diagnostika virové hepatitidy.
  • Kontaktní vyšetření.
  • Sledování účinnosti léčby.
  • Diagnóza recidivy hepatitidy C u chronických.
  • Cirhóza jater.
  • Krevní test dárce.
  • Vyšetření dětí narozených infikované matce.
  • Predikce průběhu virové hepatitidy C.
Kontraindikace a omezení

Neexistují absolutní kontraindikace.

Příprava ke studiu

  • Doporučujeme provést analýzu na lačný žaludek (8-14 hodin po posledním jídle).
  • Den před užitím biomateriálu se musíte vzdát alkoholu, užívat léky, intenzivní fyzické námahy, tučná jídla.
  • Hodinu před studií se doporučuje vyloučit kouření, pití kávy a silného čaje, sycené nápoje.
  • Nedoporučuje se provádět analýzu po fyzioterapii, masáži, rentgenovém nebo ultrazvukovém vyšetření.
Metoda výzkumu

Polymerázová řetězová reakce v reálném čase.

Formát pro prezentaci výsledků, měrné jednotky (analyzátor)

Kvantitativní analýza, IU / ml (mezinárodní jednotka na mililitr).

PCR pro hepatitidu C

PCR (nebo polymerázová řetězová reakce) je laboratorní metoda pro diagnostiku DNA a RNA patogenu zavedená Carey Mullis (USA). Pouze jedna molekula nalezená v kůži nebo tělní tekutině stačí pro vysoce citlivou PCR analýzu k identifikaci viru patogenu.

Druhy PCR

Existují tři typy PCR analýzy krve pro virus chronické hepatitidy C - kvalitativní, kvantitativní a analýza určující genotyp viru.

Kvalitativní analýza PCR na hepatitidu C se provádí u pacientů, jejichž analýza ELISA odhalila protilátky proti HVGS. Výsledek kvalitativní analýzy PCR je označen slovy „RNA detekována“ nebo „RNA nebyla detekována“. Testovací systémy s citlivostí alespoň 50 IU / ml mohou detekovat minimální množství patogenu v krvi. Při nižší koncentraci viru může analýza poskytnout falešně negativní výsledek. Aby se předešlo chybám, musí být laboratoře specializující se na diagnostiku PCR vybaveny zkušebními systémy s vysokou citlivostí. Například laboratoř Invitro používá testovací systémy s citlivostí 15 IU / ml. Pacienti a lékaři mají právo požadovat od laboratorních pracovníků údaje o citlivosti testu.

Kvantitativní analýza PCR na hepatitidu C je nezbytná pro stanovení koncentrace viru v krvi (nebo stupně virémie). Výsledky hovoří o číslech. Pokud se v 1 ml krve objeví 2 miliony IU, je výsledek následující - 2 × 10 * 6 IU / ml. Některé laboratoře používají jiný indikátor - počet kopií na 1 ml krve (1 IU jsou 4 kopie RNA). Ukazuje se, že 2 × 10 * 6 IU / ml odpovídá 8 × 10 * 6 kopií RNA viru (8 milionů kopií) v 1 ml krve.

Genotyping určuje, ke kterému ze šesti genotypů virus patří. Klinický obraz, míra komplikací a další prognóza pro pacienta ovlivňuje genotyp patogenu. Správné stanovení genotypu viru umožňuje zvolit kombinaci léčiv a stanovit délku léčby.

Indikace pro analýzu

Pro potvrzení přítomnosti HCV je předepsána analýza PCR, která pomůže detekovat patogen a zahájit léčbu. Indikace pro jmenování:

  • Pacient má známky zánětu jater.
  • Screening pro preventivní studie.
  • Je nutné vyšetřit lidi v kontaktu s pacienty s hepatitidou.
  • Hepatitida smíšeného původu je diagnostikována a musí být stanoven hlavní původce.
  • Je stanovena úroveň reprodukční aktivity patogenu u chronických pacientů..
  • U pacienta je diagnostikována cirhóza.
  • Je nutné vyhodnotit účinnost terapie.

Příprava na diagnostiku hepatitidy pomocí PCR

Procedura se provádí ráno na lačný žaludek, krev se odebírá ze žíly..

Pacient musí dodržovat následující pravidla:

  • Nejezte jídlo 10 hodin před zákrokem. Povolena je pouze čistá voda..
  • Nekuřte 4 hodiny před manipulací a nepijte alkohol den před analýzou.
  • Před zákrokem se vyhněte fyzickému a psychickému stresu.
  • Neužívejte léky 2 dny před odběrem krve. Pokud pacient z nějakého důvodu užíval léky, musí o tom být informován laboratorní asistent (použití určitých léků způsobuje chybně pozitivní výsledek).

Dekódování výsledků PCR studií

Oddělení analýzy ELISA a PCR je úkolem specialisty na hepatology nebo infekční choroby. Vyžadují se také výsledky biopsie, biochemické analýzy krve a ultrazvuku. Výsledky analýzy PCR mohou být pouze kvalifikovaným lékařem, který by měl terapii předepisovat na jejich základě. Tabulky pro dekódování virové zátěže pro hepatitidu C jsou uvedeny níže.

Kvalitativní analýza. Dešifrování

ZjištěnoPacient je infikován, protože RNA viru nalezená v biologickém materiálu.
NezjištěnoPacient není infikován nebo je množství virové RNA pod limitem citlivosti.

Kvantitativní analýza. Dešifrování

NezjištěnoTen člověk je zdravý. RNA viru nebyla v biomateriálech nalezena nebo je její koncentrace pod limitem citlivosti.
Až 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlKoncentrace virové RNA je pod kvantifikačním rozsahem. V tomto případě je při interpretaci výsledku nutná opatrnost. Často je vyžadován opakovaný výzkum..
Až 8 * 10 ^ 5 IU / mlNízká úroveň virové zátěže u hepatitidy C. Snížení koncentrace viru zpravidla znamená úspěšnou léčbu.
Větší než 8 * 10 ^ 5 IU / mlVysoká virová zátěž hepatitidy C.
Větší než 2,4 * 10 ^ 7 IU / mlProtože množství virové RNA je mimo horní hranici kvantifikačního rozmezí, není možné určit úroveň virové zátěže. Potřebujete opakovaný test s ředěním vzorku krve.

Detekovaná RNA specifického genotypuV biomateriálu pacienta byl nalezen virus hepatitidy C patřící ke specifickému genotypu a podtypu. Výsledek je označen čísly a latinskými písmeny: 1a, 2b atd. Existuje 7 genotypů a 67 podtypů. Ze 7 genotypů jsou první 3 nalezeny v Rusku.
Byla detekována RNA viru hepatitidy CRNA atypického virového genotypu pro Rusko byla nalezena v biomateriálu pacienta, proto jsou nutné další studie.
NezjištěnoČlověk je zdravý nebo je v krvi velmi nízká koncentrace virové RNA.

Analýza PCR je někdy negativní, ale test ELISA ukazuje na přítomnost protilátek proti viru. To znamená, že člověk, který měl akutní hepatitidu C, byl schopen se zotavit sám. Asi 20 případů infekce se silným odporem těla infekce končí spontánním léčením.

V některých situacích mohou být výsledky vysoce přesné PCR analýzy zkreslené:

  1. Porušení teplotního režimu a dalších podmínek pro transport krve do laboratoře.
  2. Kontaminace krve.
  3. Přítomnost stop heparinu a dalších antikoagulancií v krvi.
  4. Přítomnost inhibitorů v biomateriálu (polymerázová řetězová reakce zpomaluje nebo zastavuje).

Výhody PCR analýzy

Za prvé, jedná se o metodu včasné diagnostiky, která vám umožní identifikovat genetický materiál viru. Analýza ELISA je schopna určit pouze látky produkované tělem v reakci na infekci (imunoglobuliny). Od okamžiku infekce hepatitidou C do začátku imunitní odpovědi může uplynout několik týdnů nebo dokonce měsíců, a během tohoto období je ELISA neúčinná. PCR analýza již v prvním týdnu infekce dává odpověď.

Druhou výhodou PCR analýzy je nízká pravděpodobnost chyby. Ve studii je stanovena část genetického materiálu, která je charakteristická pouze pro jeden typ patogenu, což umožňuje vyloučit falešný výsledek. Analýza ELISA ukazuje přítomnost protilátek, které jsou uvolňovány proti různým virům (křížové protilátky).

Nevýhody PCR

Bez ohledu na to, jak efektivní je studie, má své nevýhody:

  • Během studie PRC se genetický materiál patogenů (včetně neživých) replikuje, což vede ke zkreslení výsledků. Aby se vyhodnotila účinnost léčby pomocí PCR analýzy, provede se druhá studie nejméně 2 měsíce po předchozí. Tělo pacienta musí být „očištěno“ od mrtvých virů.
  • Testovací systémy určují část virového genomu, která teoreticky může patřit k jiným virům nebo mikroorganismům, proto existuje možnost falešně pozitivního výsledku.
  • Rychlá mutace virů někdy převyšuje schopnost testovacích systémů určit patogenní genom, proto existuje šance na falešně negativní odpověď.

Výrobci laboratorních testovacích systémů je pravidelně testují a zjišťují, jak systémy reagují na zkřížené reakce nebo na jakýkoli genotyp viru..

Cena PCR analýzy pro hepatitidu C

Ve vládních institucích může být analýza provedena zdarma, je vyžadován pouze doporučení od hepatologa nebo specialisty na infekční choroby.

Placený výzkum je k dispozici ve všech hlavních městech Ruské federace. Cena je ovlivněna typem výzkumu, použitým zařízením, časem nezbytným pro analýzu.

V Moskvě a Petrohradě stojí vysoce kvalitní PCR analýza na hepatitidu C od 600 do 900 rublů v regionu - od 300 do 800 rublů.

Kvantitativní analýza PCR pro náklady na hepatitidu C od 17 000 do 22 000 rublů, pro hepatitidu B - od 1 200 do 10 000 rublů.

Chcete-li získat spolehlivé výsledky analýzy PCR na hepatitidu C, měli byste kontaktovat pouze renomované laboratoře. V tomto případě otázka nákladů na výzkum ustupuje do pozadí.