Druhy PCR pro hepatitidu B a interpretace výsledků

Polymerázová řetězová reakce je typ krevního testu, který dokáže přesně detekovat virus hepatitidy B. Rysem metody je, že je schopna prokázat HBV v raných stádiích - již měsíc po infekci, zatímco specifický antigen u pacienta je detekován až po 2 měsících. PCR dokáže detekovat nejen běžný virus DNA, ale také mutantní kmeny, které žádná jiná analýza nevidí.

Při dekódování PCR pro hepatitidu B jsou výsledky porovnány se standardními hodnotami. Na základě toho jsou učiněny závěry o přítomnosti nemoci (pozitivní výsledek), koncentraci viru (aktivita) nebo nepřítomnosti nemoci (negativní výsledek). Zpracování dat trvá 2 týdny.

Typy PCR pro virovou hepatitidu B

Existují 2 typy diagnostiky, které jsou předepsány pro hepatitidu B. Vysoce kvalitní PCR umožňuje se 100% přesností říci, zda je HBV přítomen v krvi nebo ne. Kvantitativní PCR ukazuje aktivitu viru, tj. Kolik DNA fragmentů HBV je obsaženo v 1 ml krve.

Vysoce kvalitní PCR a její interpretace

Krevní test na hepatitidu B pomocí PCR dokáže detekovat pouze přítomnost fragmentů DNA. Předepisuje se v případě, kdy má pacient podezření na infekci HBV (HBV) nebo pokud jiné diagnostické metody, například sérologické testy, nedávají jasnou odpověď. Rozdělení výsledků při kvalitativní analýze je velmi jednoduché:

  • negativní výsledek - neexistuje virus;
  • pozitivní - detekován virus.

Cílem vysoce kvalitní PCR je potvrdit nebo popřít přítomnost viru hepatitidy B a provést včasnou diagnózu. Pokud je HBV detekována během 1–2 týdnů po infekci, léčba se stane nejúčinnější. S aktivním vývojem HBV po dobu 2 měsíců nebo déle se onemocnění stává chronickým a nelze jej úplně vyléčit.

V případě, že vysoce kvalitní PCR pro hepatitidu naznačuje přítomnost viru, dalším krokem je provedení kvantitativní diagnostiky.

Kvantitativní PCR

Chcete-li předepsat účinnou léčbu nebo vyhodnotit výsledky léčby, nestačí pouze vědět, že pacient má HBV. Je nutné kvantifikovat hodnotu DNA viru hepatitidy B v 1 ml krve, tj. Virové zátěže na těle. Tento typ PCR pro hepatitidu B se provádí v následujících případech:

  1. Před předepsáním léčby.
  2. Vyhodnotit účinnost terapie.
  3. Určit vývoj rezistence viru na léky.
  4. Určit stádium, ve kterém je nemoc.

Jednotkami viru jsou mezinárodní jednotky (IU / ml) nebo počet kopií DNA / ml, tj. Počet fragmentů DNA na 1 ml krve. Poměr mezi těmito dvěma jednotkami závisí na vybraném zkušebním systému a pohybuje se od 2 do 7 kopií / ml v 1 IU / ml. Pokud není systém znám, použije se pro převod průměrná hodnota:

1 IU / ml = 5 kopií / ml

Pokud je kvantitativní analýza provedena okamžitě, hraniční normou pro diagnostiku onemocnění je 75 IU / ml. S výsledkem nad tímto ukazatelem je stanovena diagnóza HBV, níže - HBV není detekována.

Interpretace kvantitativní PCR

U hepatitidy B se jako hodnoty PCR objevují následující hodnoty virové zátěže (virémie), kopie / ml:

  • 10 ^ 5 kopií / ml. Pokud je při vysoké virové aktivitě pozorováno zvýšení hladiny ALT více než dvakrát za šest měsíců, je antivirová léčba okamžitě předepsána.

Ke zjištění, jak se bude DNA hepatitida chovat z hlediska chronizace, tj. Přechodu na chronickou formu z akutní, se také používají výsledky diagnostiky PCR:

  • HBV DNA 2 x 10 ^ 6 kopií / ml znamená, že získání chronické formy onemocnění je nevyhnutelné.

Příprava na zkoušku

Pro stanovení přítomnosti HBV pomocí PCR se provede krevní test ze žíly. Postup se provádí vždy přísně na lačný žaludek a je nejlepší se dostat do laboratoře ráno, když je přirozený čas odpočinku z jídla 8 hodin. Aby byly výsledky vyšetření správné, musíte předem vědět, jak se správně připravit na cestu na kliniku. Další kroky jsou následující:

  1. Odmítnutí mastných potravin, kouření, alkoholu a sport 12 hodin před zákrokem.
  2. Bezprostředně před odběrem krve odpočívejte 20 minut.
  3. Před zahájením zákroku je nutné sestru upozornit na užívané léky.

Pozornost! Pokud je diagnóza prováděna pro dítě do 5 let, pak půl hodiny před zákrokem, musíte ji vypít ve vroucí vodě v 1 sklenici každých 10 minut.

Shrnout

Dnes je PCR diagnostika pro detekci hepatitidy B nejpřesnější metodou. Tato metoda umožňuje vidět skryté a mutované formy nemoci, identifikovat nemoc v prvních týdnech po infekci a podle toho provádět účinnou léčbu. V závislosti na situaci se provádí kvalitativní nebo kvantitativní PCR, jejichž cílem je identifikace HBV a stanovení jeho aktivity. Abyste byli vyšetřeni, musíte kontaktovat virologa, specialistu na infekční choroby nebo hepatologa.

PCR pro hepatitidu C

PCR - moderní diagnostika hepatitidy C

Virová hepatitida C je jedním z nejvíce „zákeřných“ onemocnění jater. Dlouho je asymptomatický, což vede k chronickému procesu (v 80%). Ve většině případů to končí jaterní fibrózou, která proudí do cirhózy nebo nádoru orgánu.

Obzvláště důležité jsou metody včasné diagnostiky nemoci. Polymerázová řetězová reakce (PCR) vám umožňuje diagnostikovat několik dní po infekci.

Stručně o virové hepatitidě C

Patogen - RNA obsahující virus, který má několik podtypů. Proniká do lidského těla krví: sexuálně, transfuzí krve, injekcí a jinými invazivními lékařskými postupy.

Akutní forma nemoci nemá významné příznaky. Někdy je tu správná hypochondrium, kterou si většina pacientů nevšimne.

Chronická forma vede k narušení všech funkcí jater: intoxikace, bolest břicha, žloutenka, bolest kloubů a mnoho dalších. V tomto okamžiku se proces stane nevratným..

Chronická hepatitida C se často stává předchůdcem maligní degenerace tkáně jater.

Podstata metody PCR

Pomocí PCR je virová RNA stanovena 5 dnů po infekci. Během této doby imunitní odpověď ještě nebyla zahájena, výsledky sérologického testu budou negativní, klinické příznaky zcela chybí.

Diagnostika PCR umožňuje stanovení diagnózy v časném stádiu onemocnění, kdy adekvátní léčba významně zlepšuje prognózu pacienta. Existují dva typy PCR - kvalitativní a kvantitativní.

Kvalitní technika

Detekuje genetický materiál viru hepatitidy C v minimálním množství. Výsledek je dvou typů:

  1. „Objeveno“ - pozitivní reakce, která ukazuje na přítomnost nemoci u lidí.
  2. „Nezjištěno“ - negativní analýza, která ukazuje na nepřítomnost infekce nebo přítomnost viru v tak malých množstvích, která nejsou touto metodou fixována. To nedává 100% pravděpodobnost, že pacient nemá virovou hepatitidu C.

Krev se nejčastěji používá pro analýzu, ale vhodné jsou i sliny, semenná tekutina a jiné biologické tekutiny..

PCR pro hepatitidu C

Kvantitativní technika

Jedná se o složitější a nákladnější metodu, která se provádí podle určitých indikací:

  1. Potvrzení diagnózy pomocí pozitivní kvalitativní PCR a detekce specifických protilátek.
  2. V případě kombinované virové patologie (virus hepatitidy C často „sousedí“ hepatitidu B přenášenou stejným způsobem).
  3. Sledování účinnosti terapie. Chcete-li to provést, zjistěte úroveň virémie před léčbou, poté ve 4, 12, 24 týdnech léčby. Pokud po 12 týdnech hladina viru neklesne o dvě logaritmické jednotky, je léčivo vybráno nesprávně.
  4. Diagnóza přechodu z akutní na chronickou.

Počet virových jednotek se počítá na jednotku objemu testované tekutiny (obvykle 1 ml). Výsledek je vyjádřen v IU / ml nebo v počtu kopií virové RNA v 1 ml.

Ukazuje intenzitu virové zátěže na těle. Čím vyšší je tato hodnota, tím větší je pravděpodobnost přenosu viru na jiné lidi. Závažnost poškození jater nezávisí na úrovni virémie. K tomu existuje řada tzv. Jaterních testů..

Příprava ke studiu

Většina falešně negativních analýz vyplývá z nedodržení technologie analýzy. Abyste tomu zabránili, je třeba dodržovat následující pravidla:

  1. Zcela vyloučit kontaminanty ze vstupu do biomateriálu (podmínky absolutní sterility).
  2. Minimální koncentrace heparinu v krvi, která se používá k prevenci koagulace nebo je předepisována pacientovi pro terapeutické účely, ovlivňuje výsledek PCR. Je důležité tento problém s pacientem předem vyjasnit..
  3. Zabraňte jakýmkoli látkám z prostředí, které neutralizují enzymy v testovacích systémech PCR.

Všechny tyto požadavky se týkají činnosti laboratorních asistentů a lékařů. Pacient nemusí být speciálně připraven. Obvykle darují krev na lačný žaludek, vylučují alkohol.

Výhody PCR

Při komplexním vyšetření hepatitidy C je polymerázová řetězová reakce na prvním místě kvůli řadě výhod:

  1. Přímá izolace patogenu se schopností identifikovat jeho podtyp. V ostatních případech (sérologické reakce) se zkoumá odpověď imunitního systému na virus..
  2. Vysoká specifičnost této techniky. Pravděpodobnost získání falešně pozitivních nebo falešně negativních výsledků je minimalizována (zejména pokud dojde k narušení technologie studie).
  3. Vysoká citlivost. Většina laboratoří a testovacích systémů poskytuje citlivost alespoň 50 IU / ml. Existuje ultra PCR, kde tento údaj je 10 IU / ml. To znamená, že virus hepatitidy C lze detekovat v prvních dnech infekce..
  4. Univerzálnost. Pomocí PCR je okamžitě detekováno několik patogenů hepatitidy, pokud existují.

DŮLEŽITÉ! Viry s vysokou variabilitou genotypu (hepatitida C, chřipka) „zaměňují“ imunitní systém, což vede k fuzzy indikátorům sérologických testů (detekci specifických protilátek). Pouze PCR dává přesnou odpověď o přítomnosti genotypu patogenu v těle.

Interpretace výsledků

PCR pro hepatitidu C se obvykle provádí po sérologických testech na protilátky. Nejtěžší pro pacienty je interpretace kvantitativní verze metody. Zkusme na to přijít..

Pokud je výsledek uveden v IU / ml, jsou výsledky popsány takto (údaje se týkají ruského vybavení a zkušebních systémů):

Množství virové RNATlumočení
NezjištěnoNorma (při absenci jiných klinických nebo laboratorních příznaků) nebo množství viru pod prahem citlivosti této metody
Méně než 1,5 x 103Číslo je „pod lineárním rozsahem“, což znamená přítomnost patogenu v těle, ale bez možnosti kvantitativního popisu virové zátěže
Méně než 4 x 106Detekována virová RNA, nízká virémie (prognóza je příznivá)
Více než 4 x 106Detekována virová RNA, vysoká virémie
Více než 2 x 108Koncentrace je vysoká, nad lineárním rozsahem, což znamená velmi vysokou virovou zátěž, kterou moderní měřicí přístroje nepopisují (nepříznivá prognóza).

Tabulka ukazuje možnost tlumočení pouze pro jednu verzi ruských testovacích systémů. Každá laboratoř může používat své vlastní vybavení, což dává rozdíl v hodnotách. Výsledek se obvykle vydává buď s hotovým dekódováním, nebo s uvedením hranic normálních hodnot.

Vlastnosti interpretace PCR

Načasování zahájení léčby závisí na správné interpretaci výsledků analýzy, což je v případě hepatitidy C životně důležité pro pacienta.

Dekódování výsledků analýzy ovlivňuje několik faktorů:

  • Kvalita zařízení a citlivost zkušebních systémů. K dnešnímu dni nejběžnější Cobas Ampicolor HCV-Test a RealBest HCV RNA. Jejich citlivost není menší než 50 IU / ml. To znamená, že pokud je virus přítomen v nižší koncentraci (například v prvních dnech infekce), bude výsledek studie negativní a nemoc bude postupovat bez léčby. V poslední době se objevily ultracitlivé diagnostické systémy (nejméně 10 IU / ml). Výrazně zlepšují kvalitu diagnostiky. Náklady na takovou PCR se velmi liší - od 1800 do 10 000 rublů v závislosti na laboratoři.
  • Konečná diagnóza se provede až po třech různých studiích biologické tekutiny. Pokud je výsledek třikrát negativní, pak v těle pacienta není virus hepatitidy typu C.
  • Pro úspěšnou léčbu je nutné nejen potvrdit skutečnost infekce virem, ale také určit jeho podtyp: 1a, 1c, 2a, 2c, 2c, 3, 4, 5a, 6.
  • Výsledky jsou hodnoceny ve dvou jednotkách: ME / ml a počet kopií RNA / ml. Jejich počet se přesně čtyřikrát liší, co si musíte pamatovat, když obdržíte výsledky analýzy po ruce.

Interpretaci reakce PCR na virovou hepatitidu C by měli provádět odborníci. Lékař chápe kvantitativní ukazatele a může porovnávat shodu laboratorních výsledků s klinickým obrazem.

Někdy existují falešně pozitivní nebo falešně negativní testovací možnosti a pouze komplexní vyšetření pacienta vám umožní „nevynechat“ toto nejzávažnější onemocnění jater.

Studie viru hepatitidy B (ELISA a PCR)

Antigen viru hepatitidy B (HBsAg)

Sérový povrchový antigen hepatitidy B obvykle chybí.
Detekce povrchového antigenu hepatitidy B v séru (HBsAg) potvrzuje akutní nebo chronickou infekci virem hepatitidy B.

Při akutním onemocnění je HBsAg detekován v krevním séru během posledních 1–2 týdnů inkubační doby a prvních 2–3 týdnů klinického období. Cirkulace HBsAg v krvi může být omezena na několik dní, takže byste se měli snažit o včasné počáteční vyšetření pacientů. Metoda ELISA může detekovat HBsAg u více než 90% pacientů. U téměř 5% pacientů nejcitlivější výzkumné metody nedetekují HBsAg, v takových případech je etiologie virové hepatitidy B potvrzena přítomností anti-HBcAg JgM nebo PCR.

Koncentrace HBsAg v séru pro všechny formy závažnosti hepatitidy B ve výšce nemoci má významný rozsah fluktuací, existuje však určitý vzorec: v akutním období existuje inverzní vztah mezi koncentrací HBsAg v séru a závažností nemoci.

Vysoká koncentrace HBsAg je častěji pozorována u mírných a středně těžkých forem onemocnění. U těžkých a maligních forem je koncentrace HBsAg v krvi často nízká a u 20% pacientů s těžkou formou a 30% s maligním antigenem nemusí být krevní antigen vůbec detekován. Vzhled protilátek proti HBsAg u pacientů s tímto pozadím je považován za nepříznivý diagnostický znak; je stanoven u maligních forem hepatitidy B.

Při akutním průběhu hepatitidy B se koncentrace HBsAg v krvi postupně snižuje, dokud tento antigen úplně nezmizí. HBsAg zmizí u většiny pacientů do 3 měsíců od počátku akutní infekce.

Snížení koncentrace HBsAg o více než 50% do konce 3. týdne akutního období zpravidla ukazuje na blízké dokončení procesu infekce. Typicky je u pacientů s vysokou koncentrací HBsAg ve výšce onemocnění detekována v krvi několik měsíců.
U pacientů s nízkou koncentrací HBsAg vymizí mnohem dříve (někdy několik dní po nástupu onemocnění). Obecně je doba detekce HBsAg v rozmezí od několika dnů do 4-5 měsíců. Maximální doba detekce HBsAg s hladkým průběhem akutní hepatitidy B nepřesahuje 6 měsíců od počátku nemoci.

HBsAg lze detekovat u zdravých jedinců, obvykle v profylaktických nebo náhodných studiích. V takových případech se zkoumají další markery virové hepatitidy B - studuje se anti HBcAg JgM, anti HBcAg JgG, anti HBeAg a játra.

Pokud je negativní, je třeba opakovat testování HBsAg..
Pokud opakované krevní testy po dobu delší než 3 měsíce odhalí HBsAg, je tento pacient považován za pacienta s chronickou virovou hepatitidou B..
Přítomnost HBsAg je poměrně častým jevem. Na světě je více než 300 milionů dopravců a v naší zemi asi 10 milionů dopravců.
Ukončení oběhu HBsAg s následnou sérokonverzí (tvorba anti-HBs) vždy znamená zotavení - reorganizaci těla.

Krevní test na přítomnost HBsAg se používá pro tyto účely:

pro diagnostiku akutní hepatitidy B:

  • inkubační doba;
  • akutní období onemocnění;
  • časná fáze rekonvalescence;

pro diagnostiku chronické virové hepatitidy B;

pro nemoci:

  • přetrvávající chronická hepatitida;
  • cirhóza jater;

pro screening a identifikaci ohrožených pacientů:

  • pacienti s častými krevními transfuzemi;
  • pacienti s chronickým selháním ledvin;
  • pacienti s mnohočetnou hemodialýzou;
  • pacienti s imunodeficiencí včetně AIDS.

Posouzení výsledků studie

Výsledky studie jsou vyjádřeny kvalitativně - pozitivně nebo negativně. Negativní výsledek testu ukazuje na nepřítomnost sérového HBsAg. Pozitivní výsledek - detekce HBsAg naznačuje inkubaci nebo akutní období akutní virové hepatitidy B a chronické virové hepatitidy B.

Protilátky proti jadernému antigenu viru hepatitidy B JgG (anti-HBcAg JgG)

Normální anti-HBcAg JgG v séru chybí.
U pacientů se anti-HBcAg JgG objevuje v akutním období virové hepatitidy B a přetrvává po celý život. Anti-HBcAg JgG - přední marker HBV.

K diagnostice se používá krevní test na přítomnost anti-HBcAg JgG:

  • chronická virová hepatitida B v přítomnosti sérového HBs antigenu;
  • přenesená hepatitida B.
  • Posouzení výsledků studie

    Výsledek studie je vyjádřen kvalitativně - pozitivně nebo negativně. Negativní výsledek testu ukazuje na nepřítomnost séra anti-HBcAg JgG. Pozitivní výsledek - detekce anti-HBcAg JgG naznačuje akutní infekci, rekonvalescenci nebo dříve přenášenou virovou hepatitidu B.

    Antigen viru hepatitidy B "e" (HBeAg)

    Normální HBeAg v séru chybí.
    HBeAg se nachází v krevním séru většiny pacientů s akutní virovou hepatitidou B. Obvykle mizí v krvi před HBs antigenem. Vysoká hladina HBeAg v prvních týdnech nemoci nebo její detekce po dobu delší než 8 týdnů dává důvod k podezření na chronickou infekci.

    Tento antigen se často vyskytuje u chronicky aktivní hepatitidy virové etiologie. Zvláštní význam při stanovení HBeAg je skutečnost, že jeho detekce charakterizuje aktivní replikační fázi procesu infekce. Bylo zjištěno, že vysoké koncentrace HBeAg odpovídají vysoké aktivitě DNA polymerázy a charakterizují aktivní replikaci viru.

    Přítomnost HBeAg v krvi naznačuje její vysokou infekčnost, tj. přítomnost aktivní infekce hepatitidy B v těle subjektu a je detekována pouze tehdy, je-li v krvi přítomen antigen HBs. U pacientů s chronickou aktivní hepatitidou se antivirová léčiva používají pouze tehdy, je-li v krvi detekován HBeAg. HBeAg - antigen - marker akutní fáze a replikace viru hepatitidy B.

    K diagnostice se používá krevní test na přítomnost antigenu HBe:

  • inkubační období virové hepatitidy B;
  • prodromální období virové hepatitidy B;
  • akutní období virové hepatitidy B;
  • chronická perzistentní virová hepatitida B.
  • Posouzení výsledků studie

    Výsledek studie je vyjádřen kvalitativně - pozitivně nebo negativně. Negativní výsledek testu ukazuje na nepřítomnost HBeAg v séru. Pozitivní výsledek - detekce HBeAg naznačuje inkubaci nebo akutní období akutní virové hepatitidy B nebo pokračující replikaci viru a infekčnost pacienta.

    Protilátky proti antigenu viru hepatitidy B „e“ (anti-HBeAg)

    Anti-HBeAg v séru obvykle chybí. Vzhled anti-HBeAg protilátek obvykle naznačuje intenzivní odstranění viru hepatitidy B z těla a mírnou infekci pacienta.

    Tyto protilátky se objevují v akutním období a vydrží až 5 let po infekci. Při chronické přetrvávající hepatitidě se anti-HBeAg nacházejí v krvi pacienta společně s HBsAg. Serokonverze, tj. přechod HBeAg na anti-HBeAg s chronickou aktivní hepatitidou je často prognosticky příznivý, ale stejná sérokonverze s výraznou cirrhotickou transformací jater nezlepšuje prognózu.

    Krevní test na přítomnost anti-HBeAg se používá v následujících případech pro diagnostiku virové hepatitidy B:

  • stanovení počátečního stádia choroby;
  • akutní období infekce;
  • časná fáze rekonvalescence;
  • rekonvalescence;
  • pozdní fáze rekonvalescence.
  • diagnóza nedávno přenesené virové hepatitidy B;
  • diagnostika chronické perzistentní virové hepatitidy B.
  • Posouzení výsledků studie

    Výsledek studie je vyjádřen kvalitativně - pozitivně nebo negativně. Negativní výsledek testu ukazuje na nepřítomnost protilátek proti HBeAg v séru. Pozitivním výsledkem je detekce protilátek proti HBeAg, která může naznačovat počáteční stadium akutní virové hepatitidy B, akutní období infekce, počáteční stadium rekonvalescence, rekonvalescence, nedávná virová hepatitida B nebo přetrvávající virová hepatitida B.

    Kritéria výskytu chronické hepatitidy B jsou:

  • detekce nebo periodická detekce HBV DNA v krvi;
  • stálé nebo periodické zvyšování aktivity ALT / AST v krvi;
  • morfologické příznaky chronické hepatitidy při histologickém vyšetření jaterní biopsie.
  • Detekce viru hepatitidy B pomocí PCR (kvalitativně)

    Virus hepatitidy typu B v krvi obvykle chybí.
    Kvalitativní stanovení viru hepatitidy B pomocí PCR v krvi vám umožní potvrdit přítomnost viru v těle pacienta, a tím stanovit etiologii onemocnění.

    Tato studie poskytuje užitečné informace pro diagnostiku akutní virové hepatitidy B v inkubaci a v časném období onemocnění, kdy hlavní sérologické markery v krvi pacienta mohou chybět. Virová DNA v séru je detekována u 50% pacientů v nepřítomnosti HBeAg. Analytická citlivost metody PCR je nejméně 80 virových částic v 5 μl, které prošly detekcí DNA vzorku, specificita - 98%.

    Tato metoda je důležitá pro diagnostiku a monitorování chronického HBV. Přibližně 5–10% případů cirhózy a jiných chronických jaterních onemocnění je způsobeno chronickým transportem viru hepatitidy B. Markery aktivity takových onemocnění jsou přítomnost HBeAg a hepatitidy B v krvi..

    Metoda PCR umožňuje kvalitativní i kvantitativní stanovení DNA viru hepatitidy B v krvi. Identifikovatelným fragmentem v obou případech je jedinečná sekvence DNA genu pro strukturní protein viru hepatitidy B.

    Detekce DNA viru hepatitidy B v biomateriálu pomocí PCR je nezbytná pro:

  • řešení pochybných výsledků sérologických studií;
  • identifikace akutního stadia onemocnění ve srovnání s infekcí nebo kontaktem;
  • sledování účinnosti antivirové léčby.
  • Zmizení DNA viru hepatitidy B z krve je známkou účinnosti terapie

    Detekce viru hepatitidy B pomocí PCR (kvantitativně)

    Tato metoda poskytuje důležité informace o intenzitě vývoje choroby, o účinnosti léčby a vývoji rezistence na aktivní léky..
    Pro diagnostiku virové hepatitidy pomocí PCR v krevním séru se používají testovací systémy, jejichž citlivost je ve vzorku 50 až 100 kopií, což umožňuje detekci viru při koncentraci 5 x 10 ^ 3 -10 ^ 4 kopií / ml. PCR pro virovou hepatitidu B je určitě nezbytná pro posouzení replikace viru.

    Virová DNA v séru je detekována u 50% pacientů v nepřítomnosti HBeAg. Materiálem pro detekci DNA viru hepatitidy B může být krevní sérum, lymfocyty, hepatobioptáty.

    • Hodnocení úrovně virémie je následující:
    • méně než 2,10 ^ 5 kopií / ml (méně než 2,10 ^ 5 IU / ml) - nízká virémie;
    • od 2,10 ^ 5 kopií / ml (2,10 ^ 5 IU / ml) do 2,10 ^ 6 kopií / ml (8,10 ^ 5 IU / ml) - průměrná virémie;
    • více než 2,10 ^ 6 kopií / ml - vysoká virémie.

    Existuje vztah mezi výsledkem akutní virové hepatitidy B a koncentrací DNA HBV v krvi pacienta. Při nízké úrovni virémie je proces chronické infekce téměř nulový, s průměrnou - chronika tohoto procesu je pozorována u 25–30% pacientů as vysokou úrovní virémie se akutní virová hepatitida B nejčastěji stává chronickou.

    Indikace k léčbě chronického HBV interferonem alfa by měla být považována za přítomnost markerů aktivní replikace viru (detekce HBsAg, HBeAg a HBV DNA v séru během předchozích 6 měsíců.).

    Kritéria pro hodnocení účinnosti léčby jsou vymizení HBeAg a HBV DNA v krvi, které je obvykle doprovázeno normalizací hladin transamináz a dlouhodobou remisí nemoci, HBV DNA zmizí z krve do 5. měsíce léčby u 60%, do 9. měsíce - u 80% pacientů. Snížení hladiny virémie o 85% nebo více o třetí den od začátku léčby ve srovnání s původním slouží jako rychlé a poměrně přesné kritérium pro predikci účinnosti léčby..

    PCR analýza na hepatitidu C

    Hepatitida C je závažné onemocnění, které ničí játra. Může to vést k cirhóze. Mezi počátkem onemocnění a okamžikem, kdy se začnou protilátky vytvářet, může trvat až šest měsíců, takže není možné diagnostikovat nemoc pomocí imunosorbentového testu s enzymem. Včasná analýza onemocnění a zahájení léčby pomůže analyzovat PCR na hepatitidu C.

    Indikace studie

    Když potřebujete složit analýzu:

    • jestliže enzymový imunotest dal pozitivní výsledek;
    • pacient má příznaky cirhózy nebo poškození jater: mění se ve velikosti, zvětšuje se slezina, v břiše jsou viditelné dilatační žíly, kůže zbledne, na pravé straně břicha jsou pozorovány bolesti;
    • aktivita ALT a AST v krevním testu je zvýšena;
    • před zahájením léčby za účelem stanovení množství viru v krvi infikované osoby;
    • abyste viděli, jak účinná byla terapie. Po léčbě - sledovat své zdraví a zabránit recidivě;
    • pokud je diagnostikována hepatitida B, aby se vyloučilo smíšené poškození jater;
    • po pohlavním styku s osobou infikovanou hepatitidou.

    Cíle průzkumu

    Účelem PCR (nebo polymerázové řetězové reakce) je studovat složení krve a detekovat flavivirus (hepatitida C). Významnou výhodou této analýzy je, že rozpoznává virus ve stadiu, kdy ještě nezačal proces nevratných reakcí. PCR vám umožní vidět, jak špatně je tělo ovlivněno, ukazuje kvalitativní charakteristiky a určuje genotyp viru. To vše vám umožňuje předepsat nejvhodnější léčbu pro každý konkrétní případ..

    Varianty analýz

    PCR pro detekci hepatitidy C zahrnuje několik studií:

    • kvalitativní analýza;
    • kvantitativní analýza;
    • genotypizace.

    Kvalitativní analýza

    PCR se také nazývá kvalitativní analýza. Pokud vykazuje negativní výsledek, pak je nemožné rozpoznat virus v těle, protože jeho obsah je menší, než kolik zařízení dokáže zachytit. V takové situaci je nutné stanovit, jak citlivé je činidlo, aby se upravil další roztok..

    Analýza může ukázat pozitivní výsledek přibližně do pěti dnů poté, co byla osoba infikována.

    Kvantitativní analýza

    Tento typ analytické studie ukazuje úroveň virové zátěže, tj. Koncentraci flaviviru v těle - kolik fragmentů viru je na 1 krychlový cm krve pacienta.

    Tento typ analýzy PCR je předepsán pacientovi před zahájením antivirové terapie nebo po třech měsících léčby, aby bylo vidět, jak efektivní je předepsaný průběh..

    Tento typ analýzy ukazuje:

    • jak velké je nebezpečí nakažení jiné osoby, je tato pravděpodobnost přímo úměrná indikacím virové zátěže;
    • jaké ošetření je v tomto případě vhodné a jak plodné to bude;
    • trvání léčby - čím vyšší je koncentrace virů, tím delší bude terapie.

    Pacient by měl vědět, že závažnost onemocnění nemusí záviset na úrovni virové zátěže. Někdy, i při vysoké koncentraci virů v krvi pacienta, jsou játra jen nepatrně poškozena. Pokud však těhotná žena má vysokou úroveň virové zátěže, je pravděpodobné, že nemoc přenáší na své dítě.

    Předpokládá se, že nižší standard koncentrace RNA viru je až 600 000 IU / ml, průměr je od 600 000 do 700 000, nejvyšší od 800 000 a vyšší.

    Genotypizace

    Vzhledem k tomu, že tento virus je citlivý na vysoké mutace, je velmi důležité určit, který genotyp je během studie v krvi osoby. Celkem existuje 11 genotypů hepatitidy C a mnoho jejich poddruhů. Ale v Rusku jsou společné pouze tři: 1, 2 a 3.

    Genotypizace umožňuje určit, jak odolný je virus. Způsob léčby závisí na tom..

    Všechny genotypy hepatitidy C reagují na léčbu odlišně. 1 genotyp je léčen po dobu nejméně jednoho roku a šance na zotavení je asi 60%. Genotypy 2 a 3 jsou léčeny po dobu šesti měsíců a pravděpodobnost, že se onemocnění zbaví, je asi 85%.

    Kromě toho genotypizace umožňuje zjistit, v jakém stavu je pacientova játra. Například hromadění tuku v játrech naznačuje, že pacient trpí 3 genotypy viru.

    Krevní test v této fázi ukazuje postavu, která charakterizuje genotyp. Někdy není možné určit genotyp a odpovědi laboratoře ukazují, že nebyl zadán. To znamená, že člověk trpí genotypem, který není v této zeměpisné oblasti běžný. Abyste ji mohli detekovat, budete muset znovu projít analýzu, ale s diagnostickým systémem, který ji dokáže rozpoznat.

    Dešifrovací proces

    Při analýze PCR na hepatitidu C získanou z laboratoře jsou obvykle uvedena určitá data a vy je můžete dokonce dešifrovat sami:

    • detekováno / nedetekováno (kvalitativní analýza);
    • počet virů (kvantitativní analýza);
    • číslo genotypu;
    • název testu.

    Věří se, že největší pozornost by měla být věnována druhému bodu, protože na základě těchto ukazatelů můžete vytvořit prognózu, určit dobu trvání léčby a její typ..

    I přes srozumitelnost analýzy nemůžete samostatně diagnostikovat a samoléčit, výsledky analýzy musí být předloženy ošetřujícímu lékaři.

    Jak se připravit na analýzu

    Pro dosažení spolehlivého výsledku je důležité dodržovat řadu pravidel:

    1. Stojí za to provést testy ráno na lačný žaludek (pokuste se jíst naposledy naposledy 8 hodin před zákrokem).
    2. Než darujete krev, nepijte nic jiného než vodu.
    3. Dva dny k odstranění mastných a smažených potravin a alkoholu.
    4. Alespoň hodinu je lepší se vzdát cigaret.
    5. Nedoporučuje se provádět testy po masáži, ultrazvuku nebo RTG.
    6. Den před vyšetřením by měl pacient opustit léky, fyzickou aktivitu a emoční stres.
    7. Půl hodiny před vyšetřením by měla být klidná a uvolněná..

    Rychlost vyšetření PCR je ovlivněna tím, jaký typ viru pacient trpí a jakou metodou se provádí krevní test. V závislosti na složitosti může pacient obdržet výsledky testu za několik hodin nebo několik dní. Ale obvykle to netrvá déle než 7 dní.

    Náklady na test PCR jsou ovlivněny stavem kliniky, kam pacient půjde a jak obtížná bude analýza. Cena se pohybuje od 400 rublů do 11 tisíc.

    Je důležité, aby pacient věděl, že existuje něco jako negativní falešné testy. K tomu může dojít, pokud byla krev pro analýzu vyrobena nesprávně, v rozporu s pravidly nebo byla nepřiměřeně transportována (například se dostal do laboratoře více než dvě hodiny po odběru). V takové situaci riskuje pacient falešný dojem o svém zdravotním stavu a ztrácí drahocenný čas.

    Proto je nesmírně důležité zvolit nejvhodnější kliniku, která se stará o její pověst a nemůže si dovolit zanedbávat pacienty. Před rozhodnutím se vyplatí přečíst recenze o instituci a jejích zaměstnancích. Výběr je lepší zastavit na prestižní a známé klinice - pravděpodobnost chyby v tomto případě bude malá.

    PCR diagnostika hepatitidy

    Ceny za diagnostiku hepatitidy pomocí PCR

    • Stanovení genotypu viru hepatitidy C (virus HepAtitis C) 1660 rub.
    • Stanovení DNA viru hepatitidy B (virus HepAtitis B) v krvi pomocí PCR, kvalitativní studie 520 rublů.
    • Stanovení DNA viru hepatitidy B (virus HepAtitis B) v krvi pomocí PCR, kvantitativní studie 1560 rub.
    • Stanovení RNA viru hepatitidy C (virus HepAtitis C) v krvi pomocí PCR, kvalitativní studie 570 rub.
    • Stanovení RNA viru hepatitidy C (virus HepAtitis C) v krvi pomocí PCR, kvantitativní studie 2600 rub.

    Polymerázová řetězová reakce (PCR) je jednou z diagnostických metod, které mohou dosáhnout významného zvýšení malých koncentrací určitých fragmentů nukleové kyseliny (DNA / RNA) v biologickém materiálu (vzorek) pomocí enzymu DNA polymerázy.

    Podle Světové zdravotnické organizace je více než 2 miliardy lidí nakaženo virem hepatitidy B (HBV); počet chronických nosičů viru dosahuje 400 milionů lidí. Každým rokem je infikováno HBV asi 50 milionů lidí, asi 2 miliony z nich zemřou. Asi 500 milionů lidí je nakaženo virem hepatitidy C (HCV). V současné době tedy existuje poměrně nepříznivá epidemická situace u infekcí, které způsobují hepatitidu B a hepatitidu C.

    V tomto ohledu je pro tyto infekce důležité použít diagnostické metody, které by měly splňovat tyto vlastnosti:

    - získání výsledků analýzy co nejdříve;

    - vysoká specifičnost a citlivost jako předpoklad pro spolehlivost analýzy.

    PCR řeší následující úkoly:

    - diagnostika infekcí v nejranějších stádiích nemoci (během období seronegativního okna);

    - naznačuje nepřítomnost virů v krvi s nejistými výsledky enzymatického imunotestu;

    - odhaluje skutečné virové nosiče mezi séropozitivními jedinci;

    - umožňuje určit genotyp virů hepatitidy C (1a, 1b, 2,3a / 3b).

    PCR umožňuje stanovení DNA viru hepatitidy B nebo RNA viru hepatitidy C v testovaném materiálu (krev, propíchnutí jater) kvalitativně i kvantitativně.

    Pozitivní analýza označuje akutní nebo chronickou hepatitidu, negativní výsledek - žádná infekce.

    Indikace

    • Se zvýšením biochemické analýzy hladin AlAT a AsAT v krvi
    • Vyšetření v rámci přípravy na těhotenství nebo operaci
    • Vyšetření pacientů, kterým je často podávána intravenózní injekce
    • S nechráněným pohlavním stykem
    • Závislost
    • V přítomnosti příznaků virové hepatitidy
    • Stagnace žluči (cholestáza)

    Metodologie

    Pro diagnostiku hepatitidy se používá metoda real-time PCR na analyzátoru DT-96, činidlech technologické společnosti DNA.

    Výcvik

    Zvláštní příprava na analýzu není nutná. Před odběrem krve se doporučuje zdržet se jídla po dobu 4 hodin.

    Studie může být provedena 2 týdny po předpokládané době infekce, což umožňuje včasnou diagnózu choroby.

    Díky lékaři za operaci jsem lehce ležel na operačním stole a pod jeho podporou trochu vtipný a usnul jsem, nebylo to děsivé, moc vám děkuji za vykonanou práci. Více informací

    Vyjadřuji svou hlubokou vděčnost úžasnému lékaři Titovi Dmitrijovi Alekseevičovi za léčbu, za pozorný přístup a profesionalitu! Děkuji vám za pozitivní přístup během léčby. Více informací

    Byl jsem léčen na oddělení v IX / 2019-II / 2020, chci vyjádřit svou hlubokou vděčnost celému týmu protinádorové protidrogové terapie pod vedením nádherné citlivé doktorky Shikiny Valentiny Evgenievny. Díky atmosféře vytvořené na katedře bylo morálně snadné přenášet velmi obtížné ošetření! Díky za profesionalitu, dbejte. Více informací

    Upřímně děkuji velmi dobrému lékaři Pavlu Jurijevičovi Orekhovovi. Stalo se tak, že pro různé diagnózy jsem musel podstoupit léčbu na oddělení cévní chirurgie a Pavel Yurievich byl mým ošetřujícím lékařem. Jsem si jist, že se jedná o jeho profesionální jednání, jmenování a je doporučeno. Více informací

    Úžasný doktor. Velice vám děkuji za všechno, velmi kompetentní, pozorný a to je v naší medicíně velmi vzácné, jejím cílem je vyléčit pacienta a pomoci mu, a nejen mluvit. Můj manžel a já jsme její pacienti a jsme velmi rádi, že nás osud spojil s tak úžasným lékařem. Děkuji. Více informací

    Chci vyjádřit svou hlubokou vděčnost Jevgenijovi Jurijevičovi Khlopushinovi za jeho profesionalitu a neobvykle citlivý přístup. Doktor přistoupil ke své situaci velmi kompetentně a komplexně: provedl kompletní diagnózu a v nejkratší možné době zorganizoval nezbytnou předoperační léčbu. Skvěle provedl složitou operaci, po které jsem byl téměř o týden později schopen. Více informací

    Vyjadřuji svou nejhlubší vděčnost chirurgovi, lékaři lékařských věd, Ishchenkovi Romanovi Viktorovičovi za jeho laskavé srdce, nejvyšší profesionalitu a citlivý přístup k pacientům. Děkuji osudu, že jsme se o tomto úžasném doktorovi dozvěděli prostřednictvím programu Zdraví. Roman Viktorovich nám pomohl vyrovnat se s naším problémem. Operace, kterou provedl mému manželovi v snadné minulosti. Více informací

    Mnohokrát děkuji lékaři-coloproctologist Zinovsky Michail Vyacheslavovich. Byl na recepci 11. března 2020. Akutní bolest, sotva dosáhl svého manžela, i když jen přes silnici. Udělal všechno, jak se mi zdá, možné. Dal všechna potřebná doporučení a své telefonní číslo. Řekl, aby zavolal, pokud budou nějaké dotazy. Zavolal jsem a konzultoval jsem s ním. Více informací

    V únoru 2020 jsem skončil v onkologickém oddělení, kde mě potkala vedoucí oddělení Kosy Valentina Vasilievna. Děkuji mnohokrát za její profesionalitu a citlivý přístup. Zde jsem podstoupil nejsložitější operaci Ischenko Roman Viktorovich a Astakhov Dmitry Anatolyevich. To jsou moji tři spasící andělé.
    Nyní se rychle zotavuji. Více informací

    Vyjadřuji svou hlubokou vděčnost Arthurovi Robertovičovi za jeho profesionalitu a „zlaté“ ruce. Se svou matkou operoval dvakrát v červnu 2019 a v únoru 2020 a občas úspěšně. Velmi pozorný, citlivý a citlivý doktor. Velmi elegantní ve své práci a to potěšilo „estetiku“ z hlediska švů))) Doslova mi zachránil život.

    Požádejte o hospitalizaci nebo výzkum.
    Recepční vás budou kontaktovat a dohodnou se
    čas, který je pro vás vhodný. Nebo přejděte do online přihlašovacího formuláře.

    Virus hepatitidy C, definice RNA. (HCV-RNA, kvalitativní) v krevním séru

    Stanovení RNA viru hepatitidy C (HCV) v krevním séru polymerázovou řetězovou reakcí (PCR) s detekcí v reálném čase.

    Identifikovaný fragment je specifickým místem RNA viru hepatitidy C. Identifikované genotypy: la, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6, bez ohledu na podtyp. Specifičnost stanovení je 100%. Citlivost stanovení - 60 IU / ml.

    • Klinické příznaky hepatitidy.
    • Preventivní screeningové studie (RNA viru hepatitidy C je nejčasnějším markerem akutní infekce).
    • Kontaktujte průzkumy.
    • Diagnóza hepatitidy smíšené etiologie - identifikace vedoucího viru.
    • Identifikace fáze aktivní replikace viru v chronickém stavu.
    • Sledování účinnosti terapie.
    • Cirhóza jater.

    Interpretace výsledků výzkumu obsahuje informace pro ošetřujícího lékaře a nejedná se o diagnózu. Informace v této části nelze použít pro autodiagnostiku a samoléčení. Lékař provádí přesnou diagnózu pomocí výsledků tohoto vyšetření a nezbytných informací z jiných zdrojů: historie, výsledky jiných vyšetření atd..

    Virus hepatitidy C, plazma RNA (HCV, PCR), kvalita.

    S virem hepatitidy

    Virus hepatitidy C

    Studijní informace

    Hepatitida C je infekční onemocnění jater, které způsobuje virus HCV. Virus hepatitidy C se množí v krevních buňkách a infikuje jaterní buňky. Virus se přenáší nechráněným sexem, kontaktem s krví (například během lékařských zákroků, krevních transfuzí, pomocí jediné stříkačky atd.), Z matky na dítě během těhotenství nebo při porodu. Studie odhalí přítomnost viru v krvi po 5-20 dnech po možné infekci.

    K detekci původce hepatitidy C (HCV) dochází metodou polymerázové řetězové reakce v reálném čase. Stanoví se přítomnost genetického materiálu (RNA) viru v krvi.

    Ze všech původců virové hepatitidy má HCV největší počet variací a díky své vysoké mutační aktivitě je schopen vyhnout se ochranným mechanismům lidského imunitního systému. Existuje 6 genotypů a mnoho podtypů viru, které mají různé významy pro prognózu onemocnění a účinnost antivirové terapie.
    Hepatitida C je přenášena krví a tělními tekutinami parenterální, sexuální a transplacentální cestou. Vysoko rizikovou skupinu tvoří lidé, kteří praktikují intravenózní zneužívání drog, promiskuitní sexuální styk, stejně jako zdravotničtí pracovníci, pacienti, kteří potřebují hemodialýzu nebo krevní transfuze, vězně. Při průniku do těla HCV vstupuje do krevních makrofágů a hepatocytů jater, kde dochází k jeho replikaci. K poškození jater dochází hlavně v důsledku imunitní lýzy a virus má také přímý cytopatický účinek. Podobnost virového antigenu s antigeny lidského histokompatibilního systému způsobuje výskyt autoimunitních ("systémových") reakcí. V programu systémových projevů infekce HCV se může objevit autoimunitní tyreoiditida, Sjogrenův syndrom, ideopatická trombocytopenická purpura, glomerulonefritida, revmatoidní artritida a další. Ve srovnání s jinými virovými hepatitidami se hepatitida C stává méně živým klinickým obrazem. Ve 20 - 50% případů vede chronická hepatitida C k rozvoji cirhózy jater a v 1,25 - 2,50% k rozvoji hepatocelulárního karcinomu. Autoimunitní komplikace se vyskytují s vysokou frekvencí.

    Inkubační doba je 5 až 20 dní. Na konci inkubační doby se zvyšují hladiny jaterních transamináz, případně zvýšení jater a sleziny. Akutní období pokračuje se slabostí, ztrátou chuti k jídlu. Ve třetině případů je horečka, artralgie, polymorfní vyrážka. Jsou možné dyspeptické jevy a polyneuropatie. Cholestáza je velmi vzácná..

    Indikace pro účely studie

    Příprava ke studiu

    S touto studií, pronájem

    • 20,79. AT a AH pro HIV 1/2 (screening, kvalifikace)
    • 20,21. Hepatitida B, HBs Ag (Qual)
    • 20.80. Syphilis součet. AT (IgG a IgM) (Qual)
    • 20.118. Součet hepatitidy A, anti-HAV. AT (počet)
    • 3.9.1. Klinický krevní test s leukocytovým vzorcem a ESR (s mikroskopií krevního nátěru, když jsou detekovány patologické změny) (žilní krev)
    • 27.113. Indikátory biochemie 8

    Výsledky výzkumu

    Faktory ovlivňující výsledky výzkumu

    Interpretace výsledku

    • „Nalezeno“: V analyzovaném vzorku biologického materiálu byl nalezen fragment RNA specifický pro virus hepatitidy C, infekce virem hepatitidy C.
    • „Nezjištěno“: fragment RNA specifický pro virus hepatitidy C nebo koncentrace patogenní RNA ve vzorku pod limitem citlivosti testu nebyl v analyzovaném vzorku biologického materiálu nalezen.

    PCR pro hepatitidu C

    PCR (nebo polymerázová řetězová reakce) je laboratorní metoda pro diagnostiku DNA a RNA patogenu zavedená Carey Mullis (USA). Pouze jedna molekula nalezená v kůži nebo tělní tekutině stačí pro vysoce citlivou PCR analýzu k identifikaci viru patogenu.

    Druhy PCR

    Existují tři typy PCR analýzy krve pro virus chronické hepatitidy C - kvalitativní, kvantitativní a analýza určující genotyp viru.

    Kvalitativní analýza PCR na hepatitidu C se provádí u pacientů, jejichž analýza ELISA odhalila protilátky proti HVGS. Výsledek kvalitativní analýzy PCR je označen slovy „RNA detekována“ nebo „RNA nebyla detekována“. Testovací systémy s citlivostí alespoň 50 IU / ml mohou detekovat minimální množství patogenu v krvi. Při nižší koncentraci viru může analýza poskytnout falešně negativní výsledek. Aby se předešlo chybám, musí být laboratoře specializující se na diagnostiku PCR vybaveny zkušebními systémy s vysokou citlivostí. Například laboratoř Invitro používá testovací systémy s citlivostí 15 IU / ml. Pacienti a lékaři mají právo požadovat od laboratorních pracovníků údaje o citlivosti testu.

    Kvantitativní analýza PCR na hepatitidu C je nezbytná pro stanovení koncentrace viru v krvi (nebo stupně virémie). Výsledky hovoří o číslech. Pokud se v 1 ml krve objeví 2 miliony IU, je výsledek následující - 2 × 10 * 6 IU / ml. Některé laboratoře používají jiný indikátor - počet kopií na 1 ml krve (1 IU jsou 4 kopie RNA). Ukazuje se, že 2 × 10 * 6 IU / ml odpovídá 8 × 10 * 6 kopií RNA viru (8 milionů kopií) v 1 ml krve.

    Genotyping určuje, ke kterému ze šesti genotypů virus patří. Klinický obraz, míra komplikací a další prognóza pro pacienta ovlivňuje genotyp patogenu. Správné stanovení genotypu viru umožňuje zvolit kombinaci léčiv a stanovit délku léčby.

    Indikace pro analýzu

    Pro potvrzení přítomnosti HCV je předepsána analýza PCR, která pomůže detekovat patogen a zahájit léčbu. Indikace pro jmenování:

    • Pacient má známky zánětu jater.
    • Screening pro preventivní studie.
    • Je nutné vyšetřit lidi v kontaktu s pacienty s hepatitidou.
    • Hepatitida smíšeného původu je diagnostikována a musí být stanoven hlavní původce.
    • Je stanovena úroveň reprodukční aktivity patogenu u chronických pacientů..
    • U pacienta je diagnostikována cirhóza.
    • Je nutné vyhodnotit účinnost terapie.

    Příprava na diagnostiku hepatitidy pomocí PCR

    Procedura se provádí ráno na lačný žaludek, krev se odebírá ze žíly..

    Pacient musí dodržovat následující pravidla:

    • Nejezte jídlo 10 hodin před zákrokem. Povolena je pouze čistá voda..
    • Nekuřte 4 hodiny před manipulací a nepijte alkohol den před analýzou.
    • Před zákrokem se vyhněte fyzickému a psychickému stresu.
    • Neužívejte léky 2 dny před odběrem krve. Pokud pacient z nějakého důvodu užíval léky, musí o tom být informován laboratorní asistent (použití určitých léků způsobuje chybně pozitivní výsledek).

    Dekódování výsledků PCR studií

    Oddělení analýzy ELISA a PCR je úkolem specialisty na hepatology nebo infekční choroby. Vyžadují se také výsledky biopsie, biochemické analýzy krve a ultrazvuku. Výsledky analýzy PCR mohou být pouze kvalifikovaným lékařem, který by měl terapii předepisovat na jejich základě. Tabulky pro dekódování virové zátěže pro hepatitidu C jsou uvedeny níže.

    Kvalitativní analýza. Dešifrování

    ZjištěnoPacient je infikován, protože RNA viru nalezená v biologickém materiálu.
    NezjištěnoPacient není infikován nebo je množství virové RNA pod limitem citlivosti.

    Kvantitativní analýza. Dešifrování

    NezjištěnoTen člověk je zdravý. RNA viru nebyla v biomateriálech nalezena nebo je její koncentrace pod limitem citlivosti.
    Až 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlKoncentrace virové RNA je pod kvantifikačním rozsahem. V tomto případě je při interpretaci výsledku nutná opatrnost. Často je vyžadován opakovaný výzkum..
    Až 8 * 10 ^ 5 IU / mlNízká úroveň virové zátěže u hepatitidy C. Snížení koncentrace viru zpravidla znamená úspěšnou léčbu.
    Větší než 8 * 10 ^ 5 IU / mlVysoká virová zátěž hepatitidy C.
    Větší než 2,4 * 10 ^ 7 IU / mlProtože množství virové RNA je mimo horní hranici kvantifikačního rozmezí, není možné určit úroveň virové zátěže. Potřebujete opakovaný test s ředěním vzorku krve.

    Detekovaná RNA specifického genotypuV biomateriálu pacienta byl nalezen virus hepatitidy C patřící ke specifickému genotypu a podtypu. Výsledek je označen čísly a latinskými písmeny: 1a, 2b atd. Existuje 7 genotypů a 67 podtypů. Ze 7 genotypů jsou první 3 nalezeny v Rusku.
    Byla detekována RNA viru hepatitidy CRNA atypického virového genotypu pro Rusko byla nalezena v biomateriálu pacienta, proto jsou nutné další studie.
    NezjištěnoČlověk je zdravý nebo je v krvi velmi nízká koncentrace virové RNA.

    Analýza PCR je někdy negativní, ale test ELISA ukazuje na přítomnost protilátek proti viru. To znamená, že člověk, který měl akutní hepatitidu C, byl schopen se zotavit sám. Asi 20 případů infekce se silným odporem těla infekce končí spontánním léčením.

    V některých situacích mohou být výsledky vysoce přesné PCR analýzy zkreslené:

    1. Porušení teplotního režimu a dalších podmínek pro transport krve do laboratoře.
    2. Kontaminace krve.
    3. Přítomnost stop heparinu a dalších antikoagulancií v krvi.
    4. Přítomnost inhibitorů v biomateriálu (polymerázová řetězová reakce zpomaluje nebo zastavuje).

    Výhody PCR analýzy

    Za prvé, jedná se o metodu včasné diagnostiky, která vám umožní identifikovat genetický materiál viru. Analýza ELISA je schopna určit pouze látky produkované tělem v reakci na infekci (imunoglobuliny). Od okamžiku infekce hepatitidou C do začátku imunitní odpovědi může uplynout několik týdnů nebo dokonce měsíců, a během tohoto období je ELISA neúčinná. PCR analýza již v prvním týdnu infekce dává odpověď.

    Druhou výhodou PCR analýzy je nízká pravděpodobnost chyby. Ve studii je stanovena část genetického materiálu, která je charakteristická pouze pro jeden typ patogenu, což umožňuje vyloučit falešný výsledek. Analýza ELISA ukazuje přítomnost protilátek, které jsou uvolňovány proti různým virům (křížové protilátky).

    Nevýhody PCR

    Bez ohledu na to, jak efektivní je studie, má své nevýhody:

    • Během studie PRC se genetický materiál patogenů (včetně neživých) replikuje, což vede ke zkreslení výsledků. Aby se vyhodnotila účinnost léčby pomocí PCR analýzy, provede se druhá studie nejméně 2 měsíce po předchozí. Tělo pacienta musí být „očištěno“ od mrtvých virů.
    • Testovací systémy určují část virového genomu, která teoreticky může patřit k jiným virům nebo mikroorganismům, proto existuje možnost falešně pozitivního výsledku.
    • Rychlá mutace virů někdy převyšuje schopnost testovacích systémů určit patogenní genom, proto existuje šance na falešně negativní odpověď.

    Výrobci laboratorních testovacích systémů je pravidelně testují a zjišťují, jak systémy reagují na zkřížené reakce nebo na jakýkoli genotyp viru..

    Cena PCR analýzy pro hepatitidu C

    Ve vládních institucích může být analýza provedena zdarma, je vyžadován pouze doporučení od hepatologa nebo specialisty na infekční choroby.

    Placený výzkum je k dispozici ve všech hlavních městech Ruské federace. Cena je ovlivněna typem výzkumu, použitým zařízením, časem nezbytným pro analýzu.

    V Moskvě a Petrohradě stojí vysoce kvalitní PCR analýza na hepatitidu C od 600 do 900 rublů v regionu - od 300 do 800 rublů.

    Kvantitativní analýza PCR pro náklady na hepatitidu C od 17 000 do 22 000 rublů, pro hepatitidu B - od 1 200 do 10 000 rublů.

    Chcete-li získat spolehlivé výsledky analýzy PCR na hepatitidu C, měli byste kontaktovat pouze renomované laboratoře. V tomto případě otázka nákladů na výzkum ustupuje do pozadí.