PCR analýza hepatitidy C a interpretace výsledků

Hepatolog

Související specializace: gastroenterolog, terapeut.

Adresa: St. Petersburg, Academician Lebedev St., 4/2.

Hepatitida C je zánětlivá patologie, při které jsou postiženy jaterní buňky. Toto onemocnění se vyvíjí v důsledku proniknutí viru hepatitidy C (HVC) do lidského těla..

Forma nemoci může být akutní nebo chronická..

Nejčastěji příznaky akutní formy patologie u většiny pacientů chybí, někdy je onemocnění doprovázeno bolestmi v břiše, sníženou pracovní kapacitou, zvýšenou únavou, zhoršenou chutí k jídlu, tmavým stínem moči, změnou barvy stolice, zažloutnutím kůže a sliznic, bolestmi kloubů. Tyto příznaky se obvykle objevují 6-8 týdnů po infekci, ale mohou se objevit o šest měsíců později..

S rozvojem takových jevů je nutné kontaktovat zdravotnické zařízení a podrobit se komplexnímu vyšetření celého organismu. V rámci lékařského vyšetření se provádí krevní test na hepatitidu C..

Dnes, pomocí moderních diagnostických technik, může být tato patologie detekována v počátečním stadiu vývoje, což výrazně zvyšuje šance na úplné vyléčení nemoci.

Analýza hepatitidy C musí projít následující skupiny lidí:

  • ženy během porodu dítěte;
  • osoby se známkami hepatitidy;
  • zaměstnanci zdravotnických zařízení;
  • potenciální dárci orgánů a krve;
  • drogově závislí, infikovaní HIV, lidé, kteří vedou hektický intimní život.

Seznam nezbytných studií

Jaké testy je třeba provést s hepatitidou C? Pro přesnou diagnózu onemocnění, identifikaci jeho příčin a určení stavu jaterního parenchymu jsou nutné následující studie:

  • obecná analýza moči a krve;
  • biochemický krevní test;
  • PCR analýza;
  • krevní test k detekci protilátek proti HVC;
  • krevní test na existující protilátky proti jejich vlastním jaterním buňkám;
  • jaterní biopsie.

Dešifrování krevního testu na hepatitidu C provádí odborník. Budeme podrobněji zkoumat každou výzkumnou metodu a také zjistíme, který test na hepatitidu C je nejpřesnější..

Obecná analýza

Při provádění obecného krevního testu na hepatitidu C můžete vyhodnotit stav pacienta. Změny v krevním obrazu nejsou vnímány jako specifické příznaky hepatitidy, avšak u tohoto onemocnění se vyskytují poruchy, jako například:

  • koncentrace hemoglobinu, krevních destiček a bílých krvinek klesá;
  • zvyšuje se obsah lymfocytů;
  • je narušena koagulace krve;
  • Zvyšuje se rychlost sedimentace erytrocytů (ESR).

Obecná analýza moči umožňuje detekovat ve své složení urobeline - žlučový pigment, který se vyskytuje v moči v důsledku zhoršené funkce jater.

Biochemická analýza

Biochemický krevní test na hepatitidu C může odhalit porušení, jako například:

  • zvýšený obsah jaterních enzymů (alanin transaminázy - ALT a aspartátaminotransferázy - AST), které vstupují do krevního oběhu, když jsou poškozeny hepatocyty. V normálním stavu by tyto ukazatele u mužů neměly být vyšší než 37 IU / l, u žen - ne vyšší než 31 IU // l. Zvýšená koncentrace ALT a AST u asymptomatické hepatitidy C je často jediným příznakem tohoto onemocnění. Kromě toho se zvyšuje hladina alkalické fosfatázy glutamyl-transpeptidázy v krevním složení (obvykle ne vyšší než 150 IU / l)..
  • obsah bilirubinu (obecného i přímého) v krvi je překročen. Pokud hladina žlutého pigmentu v krevním séru přesáhne 27–34 μmol / l, objeví se žloutenka (až 80 μmol / lv mírné formě, 86–169 μmol / l v mírné formě, nad 170 μmol / l v těžké formě).
  • Hladina albuminu se snižuje, naopak se zvyšuje koncentrace globulinu gama. Gama globuliny se skládají z imunoglobulinů - protilátek, které chrání tělo před patogeny.
  • zvýšená koncentrace triglyceridů v krvi.

Studie PCR

Pomocí PCR můžete diagnostikovat původce nemoci. Provedení této analýzy umožňuje detekovat virus v krvi, i když je jeho množství minimální. PCR analýza hepatitidy C vám umožňuje určit existující infekci v krvi po 5 dnech od okamžiku infekce, tedy dlouho před objevením protilátek.

Pokud je výsledek krevního testu na hepatitidu C pomocí PCR pozitivní, znamená to přítomnost aktivní infekce v těle. Pomocí této metody můžete provést kvalitativní a kvantitativní studium HVC RNA.

V průběhu kvalitativní analýzy PCR na hepatitidu C je možné detekovat existující virus v lidském těle.

Tento diagnostický postup se provádí, pokud je v krvi detekována anti-HVC..

Interpretace testu na hepatitidu C obsahuje informaci, že v těle je detekována nebo nedetekována infekce. V normálním stavu nejsou patologické látky v krvi detekovány.

Pokud test na hepatitidu C dává pozitivní výsledek, znamená to, že patogenní mikroorganismus se neustále dělí a ovlivňuje jaterní buňky.

Výsledky takové analýzy mohou být nespolehlivé, je to možné v následujících případech:

  • s kontaminací použitého biomateriálu;
  • v přítomnosti heparinu v krvi;
  • v přítomnosti chemických nebo proteinových látek (inhibitorů) ve studovaném biomateriálu ovlivňujícím prvky PCR.

Kvantitativní analýza hepatitidy C poskytuje informace o množství viru obsaženého v krvi, tj. Určuje virovou zátěž. Tímto pojmem se rozumí množství HVC RNA přítomné v krvi (například v 1 ml). V dekódování kvantitativní analýzy pro hepatitidu C je tato hodnota vyjádřena digitálně, měřeno v IU / ml.

Krev pro PCR s hepatitidou C je darována před terapeutickými opatřeními. Po provedení analýzy v 1, 4, 12 a 24 týdnech. Studie ve 12. týdnu je indikativní a provádí se za účelem posouzení účinnosti léčebných postupů..

Pokud je analýza na hepatitidu C během těhotenství pozitivní a hodnoty virové zátěže jsou překročeny, riziko přenosu patogenů z nemocné matky na dítě se několikrát zvyšuje. Také se zvýšenými hodnotami virové zátěže je provádění terapeutických opatření obtížné.

Podle interpretace testů na hepatitidu C překračují-li hodnoty virové zátěže 800 000 IU / ml, jsou vysoké. Pokud jsou hodnoty pod 400 000 IU / ml, považuje se úroveň virové zátěže za nízkou..

PCR analýza hepatitidy C je považována za nejpřesnější a má oproti jiným možnostem výzkumu několik výhod, jmenovitě:

  • přímá diagnóza původce nemoci. Při provádění tradičního výzkumu se určuje přítomnost proteinových markerů, které jsou produkty životně důležité aktivity patogenních látek. To jen říká, že infekce je přítomna v krvi. Při provádění analýzy hepatitidy C pomocí PCR je možné určit typ patogenu nebezpečné patologie.
  • specifičnost této techniky. Během tohoto postupu se v biomateriálu stanoví jedinečná oblast DNA, která odpovídá pouze jednomu typu patogenu. To minimalizuje pravděpodobnost nepravdivých výsledků..
  • vysoká citlivost. Při provádění analýzy PCR lze detekovat minimální množství viru. To je důležité, pokud jsou identifikovány oportunistické látky, které představují hrozbu, pouze pokud se zvýší jejich hladina..
  • při použití této techniky v jednom vzorku biomateriálu lze detekovat několik patogenů najednou.
  • můžete odhalit skryté infekce. Kromě toho analýza umožňuje diagnostikovat patogeny, které žijí uvnitř buněk a mají vysokou antigenní variabilitu.

Pokud jsou výsledky studie pozitivní, pak jsou v biomateriálu detekovány stopy viru, pak má síť v těle infekci.

Negativní PCR analýza na hepatitidu C znamená, že v biomateriálu nejsou žádné stopy infekce.

Imunologický výzkum

Tato metoda umožňuje určit protilátky proti všem typům viru hepatitidy, stejně jako protilátky proti jaterním buňkám vašeho vlastního těla, jejichž vývoj je usnadněn vývojem autoimunitní hepatitidy.

Výsledky získané během studie jsou relevantní po dobu 3 měsíců, pak byste měli znovu darovat krev na hepatitidu C.

Je také možné provést expresní studii pomocí speciálních testovacích proužků. Tato analýza umožňuje stanovit protilátky proti viru C ve složení krve a slin. Tento postup lze provádět samostatně, doma.

Biopsie jater

K provedení takové analýzy se odebere prvek jaterního parenchymu a provede se histologické vyšetření získaného biomateriálu. To vám umožní posoudit stav těla: identifikovat zánětlivé, nekrotické ložiska, fázi fibrózy atd..

Dnes se používají testy, které nahrazují histologickou analýzu jaterního parenchymu.

Specifické biomarkery krve jedu se používají k hodnocení fáze poškození jater a intenzity zánětlivého procesu. Pomocí Fibrotestu můžete posoudit stupeň proliferace vláknité tkáně.

Při provádění Actitestu získáte informace o intenzitě patologických procesů v jaterním parenchymu. Pomocí Steatotestu je možné diagnostikovat tukovou degeneraci tkáně jater a zhodnotit stupeň tohoto procesu. Fibromax sestává ze všech výše uvedených testů a může zahrnovat některé další studie..

Příprava na studium

Jaké testy se provádějí na hepatitidu C a jak se provádí tento nebo ten typ studie, jsme zjistili. Stejně důležité je vědět, jak se na analýzu připravit..

K dosažení spolehlivých výsledků se doporučuje dodržovat následující požadavky:

  • testy na hepatitidu C musí být provedeny ráno, na lačný žaludek. Jídlo by mělo být konzumováno nejméně 8 hodin před studií..
  • Biomateriál lze užívat ve dne nebo večer. V tomto případě je důležité, aby mezi posledním jídlem a analýzou uplynulo nejméně 5 až 6 hodin.
  • Před darováním krve na hepatitidu C byste měli odmítnout čaj, kávu, džus nebo jiné nápoje, povolena je pouze voda.
  • 48 hodin před studií je nutné vyloučit použití mastných, smažených potravin a alkoholických nápojů.
  • alespoň hodinu před analýzou se zdržte kouření.
  • neprovádějte analýzu ihned po ultrazvuku, instrumentálním, rentgenovém vyšetření, masáži nebo fyzioterapii.
  • den před studií je nutné vyloučit užívání léků a intenzivní fyzickou aktivitu. Emoční stres je také kontraindikován..
  • 15 minut před studií se doporučuje provést v klidném stavu.

Odběr krve

Kde se dá testovat na hepatitidu C? Biomateriál je odebrán pro další výzkum v laboratoři zdravotnického zařízení nebo u pacienta doma.

Krev ze žíly se odebírá takto:

  • s pomocí speciálního turniketu omotaného kolem předloktí pacienta je žilní krevní tok pozastaven. Díky těmto manipulacím budou žíly naplněny krví a budou patrnější, což výrazně usnadní proces zavádění jehly.
  • oblast kůže, do které bude jehla zavedena, je důkladně ošetřena alkoholem nebo kapalinou obsahující alkohol.
  • jehla je pečlivě vložena do žíly, poté je k ní připojena zkumavka speciálně určená pro odběr krve.
  • ihned po zasunutí jehly do žíly se kompresní turniket vyjme z paže pacienta.
  • poté, co se odebere objem krve potřebný pro analýzu, jehla jemně odstraní z žíly.
  • na místo vpichu musí být aplikován sterilní bavlněný nebo gázový tampón namočený v alkoholu.
  • Aby se předešlo výskytu hematomu, měl by se tampon zatlačit s trochou úsilí do oblasti vpichování jehly, ohnout rameno na loketním kloubu a držet v této poloze několik minut. Takové akce také pomohou zastavit krev rychleji..

Pokud je technika vnitřní správy dobrá, je tento postup absolutně bezpečný a při čtení nezpůsobuje bolest..

Ve vzácných případech je po odběru krve možný otok žíly. Tento jev se nazývá flebitida. Komprese (ne horká) pomůže vyřešit problém, měla by být aplikována na oteklé oblasti kůže několikrát denně.

Určité problémy se mohou objevit také v případě poruchy krvácení. Užívání aspirinu, warfarinu a dalších ředidel krve může způsobit krvácení. Proto je před provedením analýzy nutné odmítnout užívat jakékoli léky. Pokud nelze léčbu zrušit, informujte odborníka.

Termíny a ceny

Kolik testu na hepatitidu C je provedeno? Výsledky krevního testu na hepatitidu mohou být hotové za několik hodin a za několik dní (obvykle ne déle než 8 dnů). Trvání přípravy výsledků závisí na typu viru a vybrané metodě analýzy. Rychlejší je studie prováděná pomocí PCR. Výsledky v tomto případě budou připraveny během několika hodin..

Kolik stojí test na hepatitidu C? Cena zákroku se může lišit v závislosti na klinice a složitosti studie od 400 do 11 000 rublů.

Měli byste si uvědomit, že vytvoření dostatečného objemu anti-HVC protilátek může trvat několik týdnů. Proto může být výsledek studie v rané fázi vývoje patologie falešně negativní.

Kromě toho je možné získat nepravdivé údaje pomocí analýzy nízké kvality a porušení podmínek přepravy získaného biomateriálu (vzorky musí být dodány do laboratoře nejpozději 2 hodiny po odběru krve).

Pokud je výsledek studie pozitivní, musíte neprodleně kontaktovat lékaře infekčního onemocnění. Specialista provede další vyšetření a předepíše příslušné ošetření..

PCR analýza na hepatitidu C

Odhaduje se, že asi 3% světové populace je infikováno virem hepatitidy C nebo virem hepatotropní RNA přenášeným krví. Mezi klíčové způsoby přenosu viru patří injekční užívání drog, nebezpečné injekční metody, krevní transfuze atd. Virus přibližně u 80% infikovaných způsobuje chronickou hepatitidu. U lidí s podezřením na hepatitidu bylo provedeno mnoho výzkumů. Antigeny viru hepatitidy C byly nalezeny v mozkomíšním moku u 8 ze 13 pacientů s HCV. Když se lékaři hlouběji vykopali, ukázalo se, že virus hepatitidy C může být transportován do mozku.

Virus hepatitidy C je hepatotropní virus, který je jednou z hlavních příčin onemocnění jater a potenciální příčinou významné morbidity a mortality na celém světě. Virus způsobuje akutní hepatitidu, která je většinou subklinická, ale u asi 80% infikovaných lidí se postupně stává chronickou hepatitidou. Lidé infikovaní HCV jsou ohroženi rozvojem chronického onemocnění jater, cirhózou a primárním hepatocelulárním karcinomem.

Lékaři doporučují screening všech jedinců s rizikovými faktory infekce HCV na protilátky proti HCV (anti-HCV) nebo v určitých situacích pomocí polymerázové řetězové reakce. Pokud provedete včasné vyšetření a provedete analýzu PCR na hepatitidu C, můžete zjistit, zda existuje nějaké onemocnění.

Co je to PCR pro hepatitidu

PCR je metoda polymerázové řetězové reakce, která se používá k detekci patogenu. Diagnostické testy na hepatitidu C lze rozdělit do následujících obecných kategorií: sérologické testy, které detekují protilátky proti viru hepatitidy C; molekulární analýzy, které detekují a kvantifikují nebo charakterizují genomy viru u infikovaného pacienta.

Sérologické testy byly rozděleny na screeningové testy na anti-HCV (enzymově vázaný imunosorbentový test) a další testy, jako je rekombinantní imunoblotová analýza. Byly vyvinuty tři generace testů PCR a každá z nich vedla ke zlepšené detekční citlivosti anti-HCV.

Nejčastěji se provádí krevní test. To pomáhá detekovat přítomnost protilátek v krvi. Pokud existuje dokonce nejmenší množství protilátek, je pacient nosičem viru hepatitidy, protože u zdravých neinfikovaných lidí je tento ukazatel nulový.

Jaký je postup

Tento postup se provádí odběrem krve v laboratoři. Příprava na analýzu není složitá. Krev by měla být odebírána ráno na lačný žaludek. Musí být dodrženy všechny sterilní podmínky, jako jsou případy, kdy je virus zaveden, když nejsou dodrženy hygienické podmínky nebo jsou rukavice znovu použity.

Další analýzy jsou odeslány k testování. Po 1-2 dnech bude analýza připravena. V některých případech se po několika dnech odebere další vzorek krve, aby se přesně potvrdila přítomnost nebo nepřítomnost RNA.

Molekulární virologické metody hrají klíčovou roli v diagnostice a sledování léčby HCV. Protože pěstování viru v buňce je obtížné, molekulární metody pomohly identifikovat virus, což z něj činí jeden z prvních patogenů identifikovaných čistě molekulárními metodami..

Metoda NAT (International Standard Method) je považována za „zlatý standard“ pro detekci aktivní replikace HCV. Je velmi účinný při diagnostice akutních infekcí, protože RNA je detekována 1 týden po možné infekci a nejméně 4–6 týdnů před sérokonverzí. Diagnóza infekce je stanovena skríningem protilátek, následovaným NATem na HCV RNA pro potvrzení a monitorováním pacientů během léčby. Základní stanovení virové zátěže je také rozhodující při určování reakce viru během terapie..

Kdy jít na PCR pro hepatitidu

PCR se provádí, když jsou protilátky proti viru hepatitidy detekovány nebo jsou podezřelé na hepatitidu C. Někdy se stane, že osoba je již nositelem hepatitidy nebo dokonce má aktivní formu tohoto onemocnění. U pacientů s chronickou hepatitidou C se pravděpodobně projeví významné změny jejich fyzického a duševního stavu, nejčastěji projevující se únavou a depresí, a samotný virus hepatitidy C může ovlivnit funkci mozku. Existuje možnost přímé infekce centrálního nervového systému.

Existuje několik možností, jak se virus přenáší, takže je musíte znát. Pokud měl pacient ve svém životě podobné situace, vyplatí se zkontrolovat HCV pomocí PCR.

Virus se přenáší z jedné osoby na druhou, hlavně parenterální cestou. Hlavní přenosové trasy jsou:

  • injekční užívání drog; použití nesterilních stříkaček;
  • krevní transfuze a injekce;
  • zdravotní postupy (pracovní expozice, jako jsou operace, sondování, některé typy vyšetření);
  • tetování;
  • pohlavně přenosná infekce.

Profesní, perinatální a sexuální přenos je méně aktivní než přenos krve. Proto tyto metody nejsou považovány za hlavní zdroje nové infekce HCV, bez ohledu na populaci nebo zeměpisnou oblast..

Screening infekce má několik potenciálních výhod. Pokud je infekce detekována brzy, může být v průběhu onemocnění navržena antivirová léčba, která je účinnější v časném než pozdním stádiu..

Kromě toho může včasná detekce spolu s doporučeními a změnami životního stylu snížit riziko přenosu infekce na jiné lidi. Nejlepší přístup k screeningu je screening osob s rizikovými faktory. Nejběžnějším případem přenosu viru je krevní transfuze..

Riziko infekce u příjemců transfúze je příliš vysoké. Až do začátku 21. století vedla krevní transfúze k vysokému riziku infekce, přibližně 15–20%. Ve 20. století bylo 90% případů post-transfuzní hepatitidy způsobeno stejnými viry..

Přechod na odběr krve dobrovolníky namísto placených dárců významně snížil riziko vzniku post-transfuzní hepatitidy (až 10%). Krevní screening dále snížil možnost post-transfuzní hepatitidy C asi 10 000krát - při současné rychlosti 1 na milion transfuzí. Několik případů, které se stále vyskytují, souvisí se skutečností, že nedávno infikovaní lidé darovali krev dříve, než vyvinuli protilátky (období okna) na virus, což může trvat až 6–8 týdnů.

Postup Účinnost

Detekce viru u pacientů během polymerázové řetězové reakce (PCR) ukazuje na přítomnost aktivní infekce a je potenciálně užitečná pro potvrzení diagnózy a sledování antivirové odpovědi na terapii.

Optimální PCR testy mají v současnosti citlivost menší než 100 kopií HCV RNA na mililitr plazmy nebo séra. Důležitou otázkou pro budoucí výzkum zůstává standardizace a kontrola kvality diagnostických laboratoří provádějících HCV PCR.

Existují dvě hlavní technologie pro stanovení hladin HCV RNA nebo virové zátěže. Kvantitativní PCR je nejcitlivějším kritériem pro stanovení virové zátěže hepatitidy C, zatímco testování DNA s rozvětveným řetězcem se zdá být nejpřesnější metodou..

Hlavními omezeními současných testů jsou nedostatečný dynamický rozsah, vysoká variabilita testů PCR a nízká citlivost testu DNA s rozvětveným řetězcem. Byly vyvinuty také molekulární testy pro klasifikaci HCV do jednotlivých genotypů..

Problém profesionálního dárcovství krve a nebezpečných injekčních metod je celosvětovým potenciálním zdrojem infekce hepatitidou C. Všichni lékaři by měli rozumět tomu, jak stanovit nebo vyloučit diagnózu infekce HCV a správně interpretovat testy..

V nepřítomnosti profylaktické nebo terapeutické vakcíny, jakož i postexpoziční profylaxe proti viru, je nezbytné diagnostikovat infekci HCV, aby se zabránilo infekci a následným komplikacím, včetně primárního hepatocelulárního karcinomu.

Nicméně hodně záleží na samotném pacientovi. Pokud si osoba všimne alespoň nějaké podezření na infekci nebo cítí určité příznaky (chronická únava, ospalost, ztráta síly), měli byste se obrátit na svého lékaře, aby vám doporučil analýzu PCR na hepatitidu C.

  1. Malysh P. N. Polymerázová řetězová reakce v diagnostice infekcí přenášených krví - Lugansk, Ukrajina, 2009

Více čerstvých a relevantních zdravotních informací na našem telegramovém kanálu. Přihlásit se k odběru: https://t.me/foodandhealthru

Specialita: specialista na infekční choroby, gastroenterolog, pulmonolog.

Celkem zkušeností: 35 let.

Vzdělání: 1975-1982, 1MI, San Gig, vyšší kvalifikace, specialista na infekční choroby.

Vědecký titul: doktor nejvyšší kategorie, kandidát lékařských věd.

Výcvik:

  1. Infekční choroby.
  2. Parazitární nemoci.
  3. Nouzové podmínky.
  4. HIV.

PCR pro hepatitidu C: kvalitativní a kvantitativní krevní test a přepis výsledků

Až do 90. let byl v lékařské literatuře používán termín „hepatitida ani A ani B s mechanismem parenterální infekce“ pro stanovení infekční hepatitidy C. Ale v roce 1989 byl poprvé izolován virus hepatitidy C (zkratka - HCV), ale spolehlivé diagnostické metody, včetně PCR pro hepatitidu C, se objevily mnohem později.

Polymerázová řetězová reakce (dekódování zkratky PCR) za účelem zjištění infekce HCV je jednou ze součástí obecného screeningu, který je povinný pro lidi a pacienty s:

  • těhotenství (studie se provádí několikrát - při registraci a v posledním trimestru);
  • dárcovství krve a orgánů;
  • u příjemců před a po transfuzi / transplantaci;
  • práce spojené se zvýšeným rizikem infekce;
  • plánování chirurgického zákroku a dalších invazivních postupů;
  • poškození jater (analýza se provádí během počátečního vyšetření);
  • provádění probíhajících hemodialyzačních postupů;
  • průvodní HIV;
  • onkologická onemocnění;
  • kontakt s infikovanou osobou.

Screening se doporučuje lidem, kteří užívají drogy, poskytují sexuální služby a jsou nečitelní při pohlavním styku. V tomto případě musí být stejné vyšetření předáno jejich společným obyvatelům nebo běžným partnerům. Test HCV je povinný pro děti narozené infikovaným matkám..

Příčinnou látkou samotnou je virus obsahující RNA potažený lipidovou membránou. Za translaci genomu je „zodpovědná“ „koncová“ oblast, sestávající z asi 340 nukleotidových podjednotek. Jeho strukturální struktura je podobná v 90% různých podtypů HCV. Je to on, kdo je hlavním cílem pro analýzu hepatitidy C pomocí PCR.

Kromě toho je složení virového genomu reprezentováno nukleárními (jádrovými) a nestrukturálními (NS) místy. První reguluje replikaci původce nemoci a NS zajišťuje rychlou penetraci viru do zdravé buňky. V místě NS E2 je často zaznamenána strukturální variabilita, což vysvětluje nedostatek vhodné imunitní odpovědi u některých pacientů, latentní vývoj patologie a tendenci k chronickému průběhu (až 80% případů).

Vzhledem k širokému rozšíření hepatitidy C se v mnoha klinických centrech provádějí bezplatné testy. Poskytování výsledků výzkumu je předpokladem pro návrh sanitární knihy.

Kromě potvrzení infekce HCV umožňují moderní diagnostické metody posoudit závažnost průběhu onemocnění a určit genotyp viru. To ovlivňuje léčebný režim (výběr kombinace léčiv, jejich dávkování, trvání podávání) a prognózu patologie.

Jaký krevní test na hepatitidu C by měl být proveden?

Krevní test na hepatitidu C lze provést několika metodami, z nichž každá se liší v obsahu informací a spolehlivosti..

Všechny metody diagnostických studií lze rozdělit do několika skupin:

  1. Sérologické, schopné detekovat určité protilátky (imunoglobuliny), které jsou produkovány v těle v reakci na proniknutí patogenu, se provádí pomocí ELISA nebo imunoblottingem..
  2. Molekulární, zaměřené na stanovení RNA viru hepatitidy C. Výsledky studie prokazují virologickou zátěž, často se používají ke sledování účinnosti léčby a ke stanovení genotypu HCV, který je důležitý pro výběr lékové léčby. Tato skupina diagnostických testů zahrnuje PCR, PCR s hybridizací-fluorescenční detekcí (metoda v reálném čase).
  3. Genotypizace je předepisována všem pacientům bez výjimky před použitím antivirotik. Je nutné naplánovat dobu, někdy - vybrat dávku lékové terapie.

Nedávno byla rozšířena analýza za účelem stanovení genotypu pacienta s ohledem na interleukin IL28B. Podle klinických studií takový test umožňuje předpovědět čas potřebný k dosažení stabilní virologické odpovědi u pacientů s genotypem HCV I během léčby inhibitory proteázy první generace..

V současné době neexistují žádné problémy, kde darovat krev na PCR nebo jiné testy k detekci HCV. Naléhavou analýzu lze provést v placené laboratoři. V okresních poliklinikách a nemocnicích se studie provádějí v pořadí podle priority (s výjimkou přísných indikací).

Pacienti se často ptají, jaká je analýza PCR pro hepatitidu C a jak se liší od jiných diagnostických metod? Tato technika spočívá v reprodukci více kopií DNA na základě virové RNA. Toto je nejpřesnější analýza ke stanovení genotypu patogenu a jeho kvantitativního obsahu jak v krevním séru, tak v biopsii jaterní tkáně.

Diagnóza infekce HCV zahrnuje řadu studií. Biochemický krevní test nemůže prokázat infekci. Odchylka výsledků (hladina jaterních enzymů, bilirubinu atd.) Od fyziologických parametrů naznačuje nesprávnou funkci jater a úkolem lékaře je zjistit příčinu tohoto problému..

Nejprve absolvují řadu jednoduchých studií, které zahrnují:

  • celkový krevní test (s HCV infekcí je možná změna hladiny leukocytů, hemoglobinu, počtu krevních buněk a dalších ukazatelů);
  • biochemie (zvýšená koncentrace jaterních enzymů, bilirubin naznačuje závažnost poškození jater);
  • testy na doprovodné infekce (povinné u HIV, někdy u některých pohlavně přenosných chorob).

Pro posouzení celkového klinického obrazu dává lékař pokyny pro analýzu moči, ultrazvukové vyšetření vnitřních orgánů, rentgen nebo rentgen hrudníku. Jsou uvedeny další diagnostické postupy.

Jaké testy na hepatitidu C je třeba provést, aby bylo možné přesně stanovit diagnózu? V souladu s doporučeními WHO začíná diagnóza HCV sérologickým testem ELISA (v přítomnosti výrazných odchylek v biochemii). Pokud tento test ukáže pozitivní výsledek, je nutné další vyšetření pacienta. Kromě PCR a obecných klinických testů je předepsán HBS ag HCV. Některá antivirová léčiva mohou vyvolat exacerbaci hepatitidy B, proto musí být tato patologie před zahájením léčby vyloučena.

Druhy PCR analýzy pro hepatitidu C: kvantitativní, kvalitativní a genotypizace

Hlavní výhodou PCR pro stanovení HCV je možnost včasné diagnostiky (18-21 dní po infekci). Detekce RNA viru v krvi nám umožňuje jednoznačně interpretovat neprůkazná data ELISA. Pozitivním výsledkem je jednoznačná indikace pro další vyšetření a předepisování léčby a negativní výsledek (s odchylkami od normy biochemických testů) - příležitost k opětovnému vyšetření po 3-4 týdnech.

Existuje několik druhů diagnostiky PCR pro HCV:

  1. Kvalitní. Co ukazuje kvalitativní analýza PCR na hepatitidu C? Podobná studie umožňuje určit, zda je osoba infikována. Odborníci doporučují, aby byl vzorek ultrasenzitivní (s náchylností testovacích systémů nejméně 10-50 IU / ml). Rozdělení výsledků je jednoduché - pozitivní ukazuje na infekci a progresivní šíření viru v těle, negativní ukazuje na nepřítomnost nemoci nebo zanedbatelnou koncentraci patogenu (je možné, že se lidský imunitní systém vyrovná se samotným patogenem).
  2. Kvantitativní. Kvantitativní analýza hepatitidy C pomocí PCR (na rozdíl od kvalitativního testu) vám umožňuje kvantifikovat virovou zátěž, tj. Hladinu HCV RNA v jednotce objemu krve. Výsledky mohou být dešifrovány na základě rozsahu normy a patologických hodnot, měřeno v IU / ml. Virová zátěž nad 75 IU / ml je považována za pozitivní. Kvantitativní testování bude negativní při hodnotách pod 75 IU / ml.
  3. Genotypizace. Podobná analýza se provádí se stanovenou diagnózou infekce HCV, aby se vyvinul individuální přístup k pacientovi. Provádí se sekvenováním a reverzní hybridizací. Virová zátěž se může v průběhu onemocnění lišit, ale genotyp zůstává stejný..

Studie různých metod PCR je ukázána v různých stádiích diagnostiky a léčby hepatitidy C. Kvantitativní opakování nejčastěji pro kontrolu účinnosti antivirové terapie.

Indikace studie

Hlavní indikace dárcovství krve pro hepatitidu C jsou:

  • těhotenství (je indikován rutinní screening);
  • preventivní vyšetření u ohrožených osob (zdravotníci, dobrovolníci v centrech pro léčbu drog);
  • HIV
  • nechráněný sexuální kontakt s infikovanou osobou;
  • nečitelný pohlavní styk.

Vzhledem k vysoké prevalenci hepatitidy C odborníci doporučují, aby každý člověk provedl preventivní studii. Při návštěvě stomatologické ordinace, manikúra / pedikúra, kde se provádí nečestná sterilizace atd., Existuje riziko infekce..

Přísnou indikací pro analýzu je výskyt charakteristických a nespecifických příznaků hepatitidy C. Mezi nejčastější příznaky patří:

  • obecná slabost;
  • dlouhodobý subfebrilní stav v nepřítomnosti jiných infekcí;
  • změna barvy stolice a / nebo moči;
  • nevolnost zvracení.

Žloutnutí sliznic a epidermální potah je vzácný. U 80% pacientů je nemoc dlouhodobě asymptomatická, často diagnostikovaná náhodně, při rutinním lékařském vyšetření.

Kde darovat krev

Analýzu hepatitidy C pomocí PCR lze provést téměř v jakékoli soukromé laboratoři nebo klinice v komunitě. Během hospitalizace se provádí vyšetření v nemocnici v nemocnici.

Výhody laboratorního centra jsou:

  1. Není třeba doporučení lékaře.
  2. Krátká dodací lhůta pro studium. Kolik analýzy provede, laboratorní asistent řekne při zadávání objednávky. Obvykle je to 1-2 dny. Některé laboratoře poskytují služby urgentního výzkumu za poplatek.
  3. Služba (bez front, výhodná platba online, příjem výsledků e-mailem).
  4. Kvalita vybavení, na kterém se studie provádí (vyloučit falešně pozitivní analýzu).

Je však obtížné určit, jaký typ PCR je nutný, aniž by se nejprve poradil s lékařem. Je také nemožné interpretovat výsledky sami. Některé laboratoře používají různé míry pro měření virové zátěže, což může způsobit chyby. Test polymerázové řetězové reakce je často součástí komplexního vyšetření, včetně laboratorních i instrumentálních testů, které je levnější provádět na klinice zdravotního pojištění.

Jak brát

Neznalost pravidel o darování krve může ovlivnit výsledky. Hlavním materiálem pro PCR je sérum. Studie jaterní biopsie je informativní, ale invazivní postup není vhodný pro rutinní analýzu. Jak správně darovat krev?

Chcete-li získat spolehlivé výsledky, dodržujte následující doporučení:

  1. Přísně darují krev na lačný žaludek: jídlo se vylučuje 10 až 12 hodin před zákrokem.
  2. 2-3 dny před analýzou se zdržte konzumace alkoholu, „těžkých“ (mastných, smažených, slaných, uzených) potravin, koření.
  3. Ráno před testem můžete pít pouze vodu (čaj, káva jsou kontraindikovány).
  4. Omezte těžkou fyzickou aktivitu denně.
  5. 10 hodin před zákrokem se musíte zdržet kouření..

Krev je odebírána z žíly.

Pokud pacient užívá nějaké léky, je nutné se poradit s lékařem a informovat odborníka. Pokud je to možné, měli byste přerušit používání léčivých přípravků den před darováním krve.

Kolik kvalitativní a kvantitativní analýzy se provádí?

Specifický časový rámec pro provádění HCV analýzy pomocí PCR závisí na pracovní zátěži laboratoře a dostupnosti nezbytného diagnostického vybavení. Například, pokud je materiál transportován z místa odběru krve do laboratorního centra, doba trvání studie se prodlouží.

Kolik se provádí průměrný test na hepatitidu C? Ve většině diagnostických center jsou pro studii stanovena následující data:

  • kvalitativní stanovení viru - 1–4 dny;
  • kvantitativní detekce virové zátěže pomocí PCR - 1-2 dny;
  • genotypizace - 1–4 dny.

Na klinikách může být toto období až 7-10 dní. Při provádění studie v soukromém laboratorním středisku se vydává potvrzení s kódem, pomocí kterého si můžete výsledky stáhnout. Jakmile je pacient připraven, zpravidla obdrží oznámení.

Dekódování PCR

Laboratorní údaje jsou pacientovi vydávány ve formě tabulky, která nutně ukazuje následující parametry:

  • typ PCR (kvalitativní, kvantitativní nebo genotypizace);
  • jaké výsledky analýzy byly získány;
  • referenční hodnoty a interpretace odchylek od normy (tento sloupec nemusí být přítomen ve všech formách, aby nedošlo k chybné diagnóze a následné samoléčbě).

Uveďte také datum odběru krve a vydání výsledků, souřadnice a pečeť laboratorního střediska, jméno a podpis zdravotnického pracovníka, který studii provedl..

Dešifrování, tj. Co znamená výsledek, by měl provádět pouze kvalifikovaný lékař.

Údaje, které může ukázat studie pomocí PCR, jsou uvedeny v následující tabulce:

Indikátory do značné míry závisí na citlivosti laboratorního vybavení

  1. Negativní (žádné vzorky RNA viru gepatitu C).
  2. Méně než 600 IU - nízká virologická zátěž, příznivá prognóza pro hepatitidu C.
  3. 600-700 000 IU - mírná virologická zátěž, je nutná léčba, pacient je nakažlivý k ostatním.
  4. Více než 700 000 IU - velmi vysoká virologická zátěž, prognóza je nepříznivá i během terapie, je vysoce pravděpodobné, že je diagnostikována chronická hepatitida C.
Typ PCRPopis získaných hodnot
KvalitníVe formuláři uveďte „zjištěno“ nebo „nenalezeno“
Kvantitativní
GenotypizaceProvádí se, pokud je detekována přítomnost viru v těle. Identifikovaný podtyp HCV je uveden ve formě

Oddělení výsledků by měl provádět kvalifikovaný odborník. Někdy tedy nastanou situace, kdy je ELISA na hepatitidu C pozitivní a PCR negativní. Tento nesoulad má několik důvodů. Může to být laboratorní chyba, takže jedna ze studií se musí opakovat po 2-3 týdnech.

Někdy takové výsledky vyplývají z latentní akutní infekce HCV. ELISA stanoví přítomnost protilátek, ale ve skutečnosti RNA viru v těle buď chybí nebo není detekována kvůli zanedbatelné koncentraci. V každém případě pacient s podobnými výzkumnými údaji potřebuje další pozorování a konzultace s lékařem.

Kvalitativní analýza

Kvalitativní analýza PCR je relativně rychlá a nejpřesnější metoda primární diagnostiky hepatitidy C. Podle výsledků studie můžete určit, zda je osoba infikována či nikoli, a poté provést podrobnější laboratorní metody. Falešně negativní výsledek je pravděpodobný v prvních 14–21 dnech po infekci, kdy množství RNA viru nestačí k detekci i vysoce citlivých testovacích systémů.

Falešně pozitivní výsledek je možný chybou laboratorního personálu. Někdy se takové údaje získávají během těhotenství, při aktivním průběhu rakoviny a / nebo autoimunitních chorob.

Aby se vyloučila možnost nesprávného dešifrování, doporučuje se opakovat kvalitativní analýzu po 3-4 týdnech.

Kvantitativní analýza

Kvantifikace PCR pro hepatitidu C je obvykle předepsána pro stanovení virémie během antivirové terapie. Normálně, když se bere léky, virologická zátěž postupně klesá. Cílem léčby jsou negativní nebo minimálně přijatelné výzkumné ukazatele.

Interpretace výsledků závisí na jednotkách používaných v laboratoři, proto se obvykle získané údaje, referenční hodnoty a popis odchylek od normy uvádějí na formuláři.

Kvantitativní analýza PCR je nezbytná pro vyhodnocení účinnosti léčby, pro výběr léčebného režimu (kombinace několika antivirových léčiv), pro stanovení délky léčby. Studie je pravidelně prováděna po ukončení léčebného postupu pro včasnou detekci relapsů..

Genotypizace

Jedna z hlavních studií prováděných v diagnostické fázi a vždy před zahájením léčby, protože genotyp je hlavním faktorem ovlivňujícím výběr léčiv.

K dnešnímu dni je známo 6 genotypů HCV (každý má své vlastní podtypy), ale v Rusku a Evropě odhaluje velká většina pacientů:

  • 1b - jedna z nejnepříznivějších z hlediska prognózy, rychle se mění v chronickou formu, agresivní vůči jaterním tkáním, obtížně léčitelná;
  • 4 - špatně „reaguje“ na terapii, vyžaduje pečlivý výběr režimu léků;
  • 2a, 3a - úspěšná léčba je zaznamenána v 70% případů a častěji (při použití moderních antivirových léků).

Zbývající genotypy jsou diagnostikovány méně často. Na rozdíl od kvantitativní analýzy je genotypizace prováděna jednou a během léčby se neopakuje (výjimkou jsou rezistentní formy HCV, které nelze léčit.

Výhody diagnostiky PCR

Přestože WHO doporučuje ELISA jako hlavní metodu pro detekci infekce HCV, testování PCR má řadu „výhod“:

  • vysoká přesnost;
  • možnost primární diagnózy;
  • posouzení účinnosti léčby ke stanovení virologického zatížení;
  • přesné určení genotypu viru, který určuje taktiku dalšího ošetření;
  • přijatelné náklady.

V každém městě jsou stanovena místa pro odběr krve, což dále usnadňuje diagnostiku a umožňuje dodávat testy každému pacientovi.

Kolik je analýza

Náklady na PCR test na hepatitidu C závisí na řadě faktorů:

  1. Cenová politika laboratorního centra a jeho umístění (například v Moskvě jsou takové služby dražší).
  2. Rozmanitost výzkumu (cena kvalitativní, kvantitativní analýzy a genotypizace se liší).
  3. Lhůty (řada laboratoří nabízí zaplatit určitou částku za naléhavé výsledky).

Zjistíte, kolik stojí PCR na hepatitidu C buď telefonicky, nebo na webových stránkách laboratoře.

Průměrná cena v Rusku je:

  • vysoce kvalitní stanovení virové RNA - 700–1 000 rublů a až 3 000 rublů pomocí ultracitlivých testovacích systémů;
  • genotypizace - 1 000–1200 rublů (v kombinaci s kvantitativním stanovením - až 4 000 rublů);
  • kvantitativní stanovení virologického zatížení - 2300 - 3 000 rublů.

Na klinice v místě bydliště se takové studie provádějí zdarma (pokud existuje povinná zdravotní pojištění). Ale laboratorní asistent musí ukázat směr ošetřujícího lékaře.